主要内容第一节色谱分离与保留作用第二节有关色谱保留的基本术语及参数第三节塔板理论第四节速率理论第五节色谱峰展宽的柱外因素主要内容第六节分离度及影响因素第七节系统适应性试验第八节测定法第九节色谱吸附或分配等温线第六节分离度及影响因素一、分离度的定义分离度分离度(resolution,缩写为R)又称作分辨率,用以衡量相邻峰的分离情况,是把柱效率和溶剂效率综合到一起的参数。一、分离度的定义分离度由下式计算:R=1:分离程度98%(又称4σ分离)R=1.25:达99.2%的分离R=1.5:达99.7%(又称6σ分离)对于两个等面积峰《中华人民共和国药典》要求“除另有规定,分离度应大于1.5”。在实际工作中,有时R=1.25时也被认可,因为GC与HPLC的误差为1%。二、影响分离度的因素分离度不仅取决于两组分的保留时间,也取决于其对应色谱峰的宽度。相同的分离度在高效或低效色谱系统中均可达到,因为影响分离度R大小的因素可以用下式表示:n为色谱柱的理论塔板数;α为相对保留值比(即分配系数比或容量因子比),即α=k2/k1,k1、k2分别为两待分离组分的容量因子;α﹥1,即k2﹥k1;k为相邻两组分中保留时间长的组分的容量因子,即k2。称为分离度方程。