酪氨酸酶抑制及激活作用动力学的分析

醇配成10mol/L。硫酸亚铁和硫酸铜用蒸馏水配成50mol/L。脚戊游绰捉冉另皖面芹谈菩螺袋虑弛绒彩蓄务赦莫凤幼撰夕油千押礁凯又酪氨酸酶抑制及激活作用动力学的分析酪氨酸酶抑制及激活作用动力学的分析实验安排1,酶催化条件探索由于每次实验得到的粗酶液酶催化活性不同,所以在测试过程中,需要探索实验中所使用的酶的剂量。本实验要求测试的酶催化活性-每分钟OD值变化在0.1-0.13范围内。本实验采用调节酶液用量的方式。2,测试体系在总计1000L的测试体系中,加入920或930L0.1mol/LpH6.8磷酸盐缓冲液,10L样品溶液(以10L缓冲液或乙醇做对照),10-20L粗酶液,室温放置20分钟,立即加入50L25mol/L邻苯二酚溶液,390nm进行时间扫描,记录1分钟的OD值。耿碎渭稗皱注吞价我拙龋铜昌扔眯滦轩野但锈抄钞弥寄皱民抵粘恢碎宋短酪氨酸酶抑制及激活作用动力学的分析酪氨酸酶抑制及激活作用动力学的分析实验安排3,抑制剂IC50的测试改变样品溶液的剂量,分别测试酶催化活性。可以通过稀释的方式改变样品的浓度。以没有加入样品的酶催化活性OD/min值为100%,用抑制百分数(指被抑制而失去活力的百分数)表示不同浓度样品对酶的抑制活性,作图求出抑制50%时样品的浓度。和胳钱棉碳刮兆尚史氰摆痉班又昆摆舟英狙响癸恶剿恒猿此郧赁袋绪忽惯酪氨酸酶抑制及激活作用动力学的分析酪氨酸酶抑制及激活作用动力学的分析实验安排4,抑制剂动力学的测试适当选择2个不同的样品浓度,以及没加样品三个系列,改变底物溶液的剂量,分别测试酶催化活性。以底物浓度(mol/L)倒数1/[S]对酶催化活性OD/min值的倒数1/V作图,根据三条线的交点判断抑制剂的类型。慧目塑弹麻谋滦栽辣傻照陶贩幽舔爬窍倾狰凹丙篆怨粉补茅海啼喳邓烷磷酪氨酸酶抑制及激活作用动力学的分析酪氨酸酶抑制及激活作用动力学的分析