,同样在蛋白质的生物合成中发挥不可替代的重要功能。因此mRNA、rRNA、tRNA在遗传信息由DNA传递到表现生命性状的蛋白质的过程中举足轻重。2RNA分布不同丰度组织名称样品量总RNA含量高丰度肝脏1mg2-4μg脾脏1mg心脏1mg中丰度大脑1mg0.05-2μg胚胎1mg肾脏1mg肺1mg低丰度膀胱1mg0-0.05μg骨1mg脂肪1mg高丰度成纤细胞1050.5-1μg人白细胞105中丰度酵母1050.5-1.5μg拟南芥叶片1mg0.2-0.5μg低丰度烟草叶片1mg0.05-0.1μg玉米叶片1mg二、方法及原理1、RNA的提取流程(1)样本前处理(2)细胞裂解(3)RNA的纯化及获得RNA提取流程--样品前处理注意点选择新鲜血液,不得超过4小时选择新鲜的幼嫩组织选择处于生长旺盛的时期收集细胞选择新鲜组织,生长旺盛的组织可将新鲜血液先进行红细胞裂解,得到的白细胞然后加入一定量的TRNzol,-70℃保存较长时间去掉培养基,加入一定量TRNzol-70℃保存较长时间推荐使用专门的RNA样品储存液进行储存液氮或加入RNase抑制剂中保存,避免反复冻融RNA提取流程--样品前处理中如何保存样本RNA提取流程--细胞裂解,以释放RNA异硫氰酸胍/酚-TRNzol总RNA提取试剂独特配方--RNAplant植物RNA提取试剂胍盐/β-巯基乙醇—RNAprep系列RNA提取试剂盒RNA提取流程--RNA的纯化及获得RNA纯化要求1纯化后不应存在对酶(如逆转录酶)有抑制作用物质2排除有机溶剂和金属离子的污染3蛋白质、多糖和脂类分子等的污染降低到最低程度4排除DNA分子的污染2.RNA提取的注意事项杜绝外源酶的污染a.严格戴好口罩,手套。b.实验所涉及的离心管,Tip头,移液器杆,电泳槽,实验台面等要彻底处理。c.实验所涉及的试剂/溶液,尤其是水,必须确保RNase-Free。
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