进行组合缓冲液以及血清的预孵化、底物启动和磷酸吡哆醛活性。确认了参考方法并将范围扩展至37℃。Р罗氏试剂?R1:TRIS缓冲液(三羟甲基-氨基甲烷)PH7.3 ; L-丙氨酸; NADH ; LDH ; 防腐剂。?R2:α-酮戊二酸盐;防腐剂。?检测原理:通过标准方法进行紫外线下检测?α-酮戊二酸盐+ L-丙氨酸= L-丙氨酸盐+丙酮酸盐? ALT可促进反应达到平衡。可通过受LDH催化的指示剂反应来检测丙酮酸盐的增加。?丙酮酸盐+ NADH + H+ = L-乳酸盐+ NAD+?NADH被氧化为NAD+ (烟酰胺腺嘌呤二核苷酸)。分光光度计所检测到的NADH的减少与丙酮酸盐的形成速度—即ALT的活性值成正比。РEB病毒和巨细胞病毒都可以引起肝损伤,传染性单核细胞综合征患者血清ALT大多升高,部分可有黄疸。?在重症肝炎时, ALT半衰期短(2-6d),由于大量肝细胞坏死,血中ALT逐渐下降,而此时胆红素却进行性升高,即出现“胆酶分离”现象,这常常是肝坏死的前兆。但不是较早的指标,也不是唯一的指标。并非全部重症肝炎都有此现象,判断预后仍需结合临床,综合多种因素。?在急性肝炎恢复期,如果出现ALT正常而r-GT持续升高,常常提示肝炎慢性化。患慢性肝炎时,如果r-GT持续超过正常参考值,提示慢性肝炎处于活动期。Р碱性磷酸酶РALP在胆汁诱导下由肝细胞合成分泌,自胆道排泄,是反映肝功能和骨质发育状况以及骨骼疾病的诊断和疗效的生化指标。健康人血清ALP,小儿主要来自骨骼,成人来自肝脏系统。?肝病时ALP升高程度为:胆汁淤积>肝癌>肝細胞损伤。?ALP活性降低可发生于甲减、恶性贫血、锌缺乏、和先天性低磷酸酶血症、某些药物(安妥明、口服避孕药)、标本溶血或乳糜、高蛋白饮食。?餐后2h(尤以高脂餐),小肠分泌的ALP进入血中,可使ALP升高1.5—2倍,持续6h。故应空腹12h采血检测ALP