实验三动物细胞的传代培养Р实验目的Р了解和掌握动物细胞传代培养的基本方法及其?操作过程。Р实验原理Р1. 贴壁生长细胞传代? 采用酶消化法传代。常用的消化液有0.25%的胰蛋白酶液。?2. 半悬浮生长细胞传代(Hela细胞)?此类细胞部分呈现贴壁生长现象,但贴壁不牢,可用直接吹打法使纫胞从瓶壁脱落下来,进行传代。?3. 悬浮生长细胞传代? 离心法传代:离心(1000转/分)去上清,沉淀物加新培养液后再混匀传代。? 直接传代法:悬浮细胞沉淀在瓶壁时,将上清培养液去除1/2一2/3,然后用吸管直接吹打形成细胞悬液再传代。Р实验用品Р器材:超净工作台、无菌细胞培养瓶、离心管、? 吸管、橡皮塞、酒精灯等?试剂:PBS、75%酒精及酒精棉球、含10%小牛血? 清的1640培养液、0.25%胰蛋白酶消化液?实验动物:贴壁细胞系Р实验方法Р(贴壁生长细胞传代)Р中止消化、吹散细胞Р细胞传代Р37℃、5%CO2培养Р思考题Р简述动物细胞传代培养的操作程序及注意事项?
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