第十七章动物细胞培养制药工艺Р动物细胞培养的应用Р动物细胞培养制药工艺Р17.1 制药动物细胞的表达系统与特征?17.2 基因工程动物细胞系的构建?17.3 动物细胞培养基的制备?17.4 动物细胞培养技术?17.5 培养过程检测与工艺控制Р17.1制药动物细胞的表达系统与特征Р一、动物细胞的结构与功能?二、制药动物细胞的种类?三、生产用细胞系?四、动物细胞的生产特征Р17.1制药动物细胞的表达系统与特征Р1.动物细胞的结构与功能Р2、动物细胞培养的代谢特征Р葡萄糖和谷氨酰胺:能量和合成代谢的前体。?葡萄糖限制:通过增加谷氨酰胺消耗得以补偿,反之亦然。?葡萄糖代谢:糖酵解为主,生成丙酮酸和乳酸,乳酸分泌到胞外并在培养液中积累。另一条途径为TCA循环,彻底氧化产生CO2和水。一小部分为戊糖磷酸途径,生成4、5、7碳糖和NADPH。?中间产物进入脂肪酸代谢、核酸代谢和氨基酸代谢。?葡萄糖代谢旺盛,产生大量乳酸,对细胞有毒性。Р三羧酸循环Р2、动物细胞培养的代谢特征Р谷氨酰胺代谢:脱氨、转氨等,合成其他非必需氨基酸。?脱氨作用:生成谷氨酸,脱氨产生的氨,对细胞有毒性。?转氨作用:生成嘧啶,嘌呤,氨基糖等合成代谢前体。谷氨酰胺与丙酮酸发生转氨作用,生成丙氨酸,进入培养液并积累。?离体动物细胞,转氨是主要代谢途径;?Gln是动物细胞的氮源,Gln受限制时,通过增加其他氨基酸的消耗得以补偿。?流加葡萄糖或谷氨酰胺,控制整个代谢过程,避免有毒废物的积累。