基因工程目的基因的分离

以切割它,而HpaⅡ就不能切割此序列。Р(2)同尾酶Р来源不同,识别的核苷酸序列也不同,但切割后DNA分子产生的粘性末端却相同,这种酶称为同尾酶。РSalⅠ 5’-G↓TCGAC- 3’ 5’-G- -TCGAG- 3’? 3’-CAGCT↑G- 5’ 3’-CAGCT -G- 5’?和?XhoⅠ 5’-C↓TCGAG- 3’ 5’-C- -TCGAG- 3’? 3’-GAGCT↑C- 5’ 3’-GAGCT -C- 5’?两个粘性末端再连接后,产生? 5’-GTCGAG- 3’? 3’-CAGCTC- 5’?该DNA既不能为SalⅠ也不能为XhoⅠ所识别。Р5、限制性核酸内切酶的命名Р6、限制性核酸内切酶识别序列的长度与识别位点的频率Р(1)第一个字母是酶来源物种的属名的第一个字母,且大写;第二、三个字母是酶来源的种名的前两个字母,用小写。该3个字母是酶的名称;?(2)若有特殊的菌株,在3个字母后加菌株号,用变种或品系的第一个字母,且大写;? (3)如果一种特殊寄主菌株分离出几个不同的限制修饰体系,按照发现和分离的顺序用罗马数字Ⅰ、Ⅱ、III……表示。如从大肠杆菌(Escherichia coli)R株分离的第一种限制酶称为EcoRIР在DNA 中,若A、T、G、C四种核苷酸以相同频率出现,那么,一段DNA中,某一内切酶识别的位点,即核苷酸随机结合的位点的数量为1/4n (n为识别序列的长度)。Р二、DNA连接酶Р三、DNA聚合酶Р能够催化DNA中相邻的3’-羟基和5’-磷酸基末端之间形成3′,5′-磷酸二酯键,Р1、T4DNA连接酶?可连接带匹配粘末端的DNA分子,也可使平端的双链DNA分子相互连接。Р2、大肠杆菌DNA连接酶Р是基因工程中常用的一种酶,此酶在全酶时(分子量109000D)主要有3种酶活性:,Р1、大肠杆菌DNA聚合酶IР只能连接带匹配粘末端的DNA分子