、α2、β、γ球蛋白5条主要区带。?2.功能分类法—复杂Р运输载体类?免疫球蛋白?补体蛋白类?凝血因子类?蛋白酶抑制物?血清酶类?蛋白类激素Р第7页Р血清总蛋白及主要组分正常与异常电泳Р人血浆总蛋白(total protein,TP)浓度为60~80g/L?临床实验室采用的标本多为血清?测定血清TP的首选方法:双缩脲法Р样品采集时,患者应置仰卧位,直立时升高。?静脉采血时止血带压迫静脉时间超过3min,TP也可上升10%。?剧烈运动后立即采血TP最多可升高12%。Р第8页Р检测方法评价Р血清总蛋白测定Р蛋白质测定一般利用下列四种蛋白质特有的结构或性质:? ①重复的肽链结构? ②酪氨酸和色氨酸残基? ③与色素结合的能力? ④沉淀后借浊度或光折射测定? 以上这些原理不仅适合于生物样品总蛋白的测定,也可用于分离出的蛋白质组分的测定。Р第9页Р血清总蛋白测定Р凯氏定氮法(Kjeldahl method)Р1883年建立,是经典的蛋白质测定方法。根据蛋白质平均含氮量16%计算蛋白浓度。? 该法结果准确性好,精密度高,灵敏度高,是公认的参考方法,目前用于标准蛋白质的定值和校正其他方法等,并可适用于一切形态(固体和液体)样品。? 但该法操作复杂、费时,不适合血清总蛋白等常规测定,而且血清等样品中各种蛋白质含氮量有少许差异,尤其在疾病状态差异可能更大。Р第10页Р双缩脲法(biurea method)Р血清总蛋白测定Р2个尿素分子缩合后生成的双缩脲(H2N-OC-NH-CO-NH2)在碱性溶液中与铜离子作用形成紫红色的反应物,蛋白质中的肽键(-CONH-)在碱性溶液中也能与Cu2+作用产生紫红色络和物。? 因此将蛋白质与碱性铜反应的方法称为双缩脲法。因至少含2个-CONH-基团才能与Cu2+络合,故氨基酸及二肽无反应,三肽以上才能反应,在体液中小分子肽含量极低,对蛋白质定量来说可忽略不计。
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