实验酶联免疫吸附测定.ppt

抗原-抗体反应的基本检测方法Р凝集反应(agglutination):颗粒性抗原与抗体的反应。Р沉淀反应(precipitation):可溶性抗原与抗体的反应。Р补体参与的反应Р免疫标记技术(immunolabelling technique):用示踪物质标记抗原或抗体,进行抗原-抗体反应的检测。Р基础医学院免疫学教研室Р用示踪物质标记抗体或抗原,使其与相应的抗原或抗体反应,使微量的、不可见的反应成为可见的或可测定的。Р免疫标记技术Р基础医学院免疫学教研室Р用FITC-抗IgM单抗计数B细胞Р免?疫?荧?光?技?术Р基础医学院免疫学教研室Р课程内容РELISA的原理?ELISA的分类?间接ELISA的具体操作?ELISA在医学中的应用实例Р基础医学院免疫学教研室Р酶免疫测定(enzyme immunoassay, EIA)Р酶联免疫吸附试验?(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)Р原理:将抗原(抗体)固相化,与酶标记的相应抗体(抗原)结合后,加入该酶作用的底物,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,由此进行定性或定量分析。Р方法:直接ELISA、间接ELISA、夹心ELISA、竞争ELISA等Р基础医学院免疫学教研室РELISA的原理Р1.抗原抗体反应的特异性Р 2.抗原或抗体的固相化Р 3.抗原或抗体的酶标记РEР基础医学院免疫学教研室РELISA的分类Р(一)直接法?(二)间接法?(三)双抗体夹心法?(四)竞争法Р基础医学院免疫学教研室Р直接ELISAР酶标一抗Р基础医学院免疫学教研室Р间接法的原理为利用酶标记的抗抗体以检测已与固相抗原结合的受检抗体,故称为间接法。? 其优点在于只要变换包被抗原就可利用同一酶标抗抗体建立检测相应抗体的方法。可用于传染病的诊断。Р间接法(测抗体)Р基础医学院免疫学教研室