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第5章 酶学分析技术

上传者:hnxzy51 |  格式:ppt  |  页数:56 |  大小:1041KB

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示,单位是一个人为规定的标准,是指在规定条件下,使酶反应达到某一速度所需要的酶量,酶单位有三种表示方式。? 1. 惯用单位 60年代前,各种酶活力的表示法和酶单位定义没有统一标准,一般由方法的设计者自行规定在某一特定条件下生成一定量的产物为一个单位。? 这样,同一种酶由于测定方法不同,可有不同单位定义,如ALT的比色测定法有金氏法、穆氏法、赖氏法,三种方法原理相同,但单位的定义不同,正常参考范围也不同。РKing法每100ml血清在37℃与底物作用60min,每生成1μmol丙酮酸为一个酶活性单位。? Mokum法 1ml血清37℃与底物作用60min每产生5μg丙酮酸为一个酶活性单位。? Reitmen法套用Karman单位,在规定条件下(血清1ml,反应液总量3ml,25℃,作用1min,内径1cm比色杯)测定340nm波长处,吸光度减少值,每减少0.001为一个酶活性单位。Р2. 国际单位 1961年国际生化学会酶学委员会建议使用统一的国际单位(IU)是指在规定条件下(如25℃,最适pH,最适[S]时)每分钟催化1μmol底物发生反应的酶量。? 1965年改为30℃,1972年取消对温度的规定。Р缺点:? (1)由惯用单位换等成IU较麻烦。? (2)对分子量不明的底物无法计算其摩尔浓度。? (3)同一种酶用不同的测定方法,换算成国际单位后仍不相同。Р3. Katal单位为了与法定计量单位(SI)接轨,1972年国际酶学委员会又提出的一种新单位,是指在最适条件下,每秒使1mol底物发生变化的酶量。? 1 Kat=60×106IU? 1 nKat=0.06IU? 1 IU=16.67nKatР二、酶促反应进程Р酶促反应不同于一般催化反应,反应不是瞬时完成的,而是经过一个进程。? 如果在酶反应过程中测得的产物[P]或底物[S]的变化量对时间作曲线可得到酶促反应时间进行曲线。

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