单位需根据其定义的不同进行适当换算。c.SOD酶活力的计算:参考上图A和B,SOD酶活力和抑制百分率呈非线性关系,而1/SOD酶活力和1/抑制百分率成线性关系。上图仅作参考,不同的样品不同的检测条件,实际测定获得的标准曲线的斜率和截距可能和上图有较明显的差别。SOD酶活力的计算公式如下:待测样品中SOD酶活力单位=检测体系中SOD酶活力单位=抑制百分率/(1-抑制百分率)units例如,当抑制百分率为50%时,待测样品中SOD酶活力单位=50%/(1-50%)units=1unit;当抑制百分率为60%时,待测样品中SOD酶活力单位=60%/(1-60%)units=1.5units。d.如果样品为细胞或组织的匀浆液,可以根据样品的蛋白浓度和稀释倍数,将SOD活力单位换算为U/g或U/mg蛋白。如果样品为红细胞抽提液,可以根据血红蛋白含量,可换算为U/克血红蛋白或U/毫克血红蛋白。附1:SOD酶活力计算的参考方案:可以先使用本试剂盒绘制SOD标准品的抑制百分率曲线,然后根据样品检测到的抑制百分率对比标准品的抑制百分率曲线计算出样品中的SOD酶活力单位。本方案仅供参考,使用本试剂盒时不必使用本方案进行检测和计算。此外,本方案需确保标准品的酶活力数据可靠,不会因为标准品的保存问题而导致实际酶活力下降。附2:SOD酶活力的动力学检测:如果条件许可,使用本试剂盒时也可以使用动力学方法检测SOD的酶活力。通常在步骤3a后可以37℃孵育同时在560nm连续测定吸光度30分钟。根据30分钟内的吸光度变化的斜率计算出抑制百分率:抑制百分率=[(斜率空白对照1-斜率空白对照2)-(斜率样品-斜率空白对照3)]/(斜率空白对照1-斜率空白对照2)×100%其余的计算方法同上述非动力学的计算方法。动力学方法的检测和计算更加精确一些,但检测起来相对要麻烦一些。使用本试剂盒通常使用非动力学方法即可。
全文预览
