-D (IgM) Biotest。Р 3.5%及 0 型试剂红细胞盐水悬液,制备方法见附注。Р 【操作步骤】Р 1.取小试管 3 支(或玻片一张划成三等分),分别标明抗 A、抗 B、抗 D,用滴管分Р别加抗 A、抗 B、抗 D 分型血清各 1 滴,再以滴管分别加受检者 5%红细胞(取 1 滴压积Р红细胞加 16 滴生理盐水)悬液 1 滴,混和。Р 2.另取小试管 3 支(或玻片一张划成三等分),分别标明 A、B、O 细胞,用滴管分Р别加入受检者血清 1 滴,再分别滴加 A、B、O 型 5%试剂红细胞悬液 1 滴,混和。Р 3.立即以 1000r/min 离心 1min(或将玻片不断轻轻转动,使血清与细胞充分混匀,连Р续约 15min)。Р 4. 将试管轻轻摇动,先以肉眼观察有无凝集(或溶血)现象。如肉眼不见凝集,应Р将反应物倒于玻片上,再以低培镜检查。Р 5.观察结果时既要看有无凝集,更要注意凝集强度,此有助于 A、B 亚型、类 B 或РcisAB 的发现。Р 6.凝集强度判断标准:Р 4+=红细胞凝集成一大块,血清清晰透明。Р 3+=红细胞凝集成数小块,血清尚清晰。Р 2+=红细胞凝块分散成许多小块,见到游离红细胞。Р 1+=肉眼可见大颗粒,周围有较多游离红细胞。Р ±=镜下可见数个红细胞凝集在一起,周围有很多游离红细胞。Р MF=混合凝集外观(mixed field)是指镜下可见少数红细胞凝集,而极大多数红细胞Р仍呈分散分布。Р -表示阴性,镜下未见凝集,红细胞均匀分布。见表 2-1Р 表 2-1 ABO 血型正反定型结果Р 分型血清+受检者红细胞受检者血清+试剂红细胞Р 受检者血型Р 抗—A 抗—B 抗—A+B A 细胞 B 细胞 O 细胞Р + - + A - + -Р - + + B + - -Р - - - O + + -Р + + + AB - - -Р 10