Р第三节RhD血型鉴定标准操作程序РRhD血型鉴定标准操作程序РRhD血型系统通过输血或妊娠可产生免疫性抗体,当遇到相应抗原,可致溶血反应或新生儿溶血病。若误诊误治,可导致患者残废或死亡。临床输血时,一般需作助血型鉴定。Р 一、RhD血型鉴定标准操作程序Р【原理】Р 应用血凝试验检测红细胞抗原。RhD血型是由红细胞表面是存在或缺失D抗原确定。D抗原于细胞株BS226细胞产生的单克隆抗体发生特异性反应。Р 【试剂】Р RhD(IgM)血型定型试剂盒(单克隆抗体)Р Р 【操作】Р 1.盐水法取小试管(10mm×60mm)1支,蜡笔标记,加试剂1滴,再加人5%受检者红细胞1滴,混匀,1000r/min离心1min观察结果。Р2.对照管用蜡笔标记阳性和阴性,分别加人抗D血清(IgM)1滴,阳性对照管加Rh阳性红细胞1滴,阴性对照管加Rh阴性红细胞1滴,混匀,1000r/min离心1min观察结果。 3.结果判定如阳性对照管凝集,阴性对照管不凝集,受检管凝集,即表示受检者红细胞上有相应抗原;受检管不凝集,即表示受检红细胞上没有相应抗原。Р【附注】Р 1.单克隆IgM Rh抗血清有商品试剂供应,可用盐水介质做凝集试验。抗血清(IgM)1滴,加5%受检者红细胞悬液1滴,混合,置7℃水浴1h,观察凝集反应。Р 2.如临床上只要求检查是否为Rh(D)阳性还是阴性,只需用抗D血清进行鉴别。如结果为阴性,则应进一步检查排除弱D。Р 3.在我国汉族人群中,Rh阳性占99.66%,Rh阴性占0.34%。Р 4.阳性对照可取3人0型红细胞混合配成。阴性对照不易得到,一般设计方法为正常AB型血清1滴,加5% D阳性红细胞悬液1滴和菠萝酶试剂混匀,与受检管一同置7℃水浴1h。Р 5.Rh血型鉴定应严格控制温度与时间,因Rh抗原、抗体凝集反应时,凝块比较脆弱,观察反应结果时,应轻轻侧动试管,不可用力振摇。
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