三代遗传标记

E公司的Zabean和Vos等发明,并已申请专利。AFLP是近年来迅速发展起来的一种分子标记技术,它将基因组DNA用成对的限制性内切酶双酶切后产生的片段用接头(与酶切位点互补)连接起来,并通过5′端与接头互补的半特异性引物扩增得到大量DNA片段,从而形成指纹图谱的分子标记技术。AFLP指纹呈孟德尔式共显性和显隐性遗传。优点:它兼具RAPD与RFLP的优点,有较高的稳定性,用少量的选择性引物能在较短时间内检测到大量位点,并且每对引物所检测到的多个位点都或多或少地随机分布在多条染色体上,各染色体上AFLP标记的数目与染色体长度呈正相关(r=0.501),而一对引物获得的标记涉及的染色体数与标记数呈正相关(r=0.826)。因此,通过少量效率高的引物组合,可获得覆盖整个基因组的AFLP标记。目前,AFLP作为一种高效的指纹技术,已在遗传育种研究中发挥它的优势。缺点:不过也有研究认为,AFLP对基因组纯度和反应条件要求较高,另外用于遗传作图时,少数的标记与图谱紧密度有出入。此外,在RAPD和RFLP技术基础上建立了SCAR(Sequencecharacterizedamplifiedregions,序列特异性扩增区域)、CAPS(Cleavedampli2fiedpolymorphicsequence,酶切扩增多态序列)和DAF(DNAam2plifiedfingerprints,DNA扩增指纹)等标记技术。这些技术的出现,进一步丰富、完善了第1代分子标记技术,增加了人们对DNA多态性的研究手段。 1.2 第2代分子标记2.1 SSR标记技术。    在真核生物基因组中存在许多非编码的重复序列,如重复单位长度在15~65个核苷酸的小卫星DNA(MinisatelliteDNA),重复单位长度在2~6个核苷酸的微卫星DNA (MicrosatelliteDNA)。小卫星和微卫星DNA