mir181a的表达载体构建及其在胰腺癌细胞中抑制作用的初步探讨

ttgcttca gtgaacattc aacgctgtcg gtgagtttgg aattaaaatc atcg accgttgatt tatg atc a一3’Р插入序列Р13Р5’一g atc agcggtggtc tcactgctca ctggttcttg ggatgtggat gggagaatga agaagggcta agc cttcagagga aaggaa cattcaacgc tgtcggtgag tttgggattt a gttg tt tta cagacgacac t gaagcaaaag agcaagctgt accttcaca一3’Р6.2插入的EGFP序列РACРTGGTCGAGCTGGACGGCGACGT从 TGAAGTTCРTACGGCGTGCAGTG РGAGGTGAAGTTCGAGGGCGAC TGGGGCACAAGCT GACAAGCAGAAGAACGGCATCAAGGTG从CT ATCРAA GGGATCACTCTCGGCATGGACGAGC TGTACAAGР7.本实验所用的试剂盒Р(1)DNA提取试剂盒:?PureLink倒HiPure Plamid Midiprep KitР(Invi trogen,Invi trogen,Carl sbad,CA,USA); OMEGA公司Plasmid Mini Kit I; 天佑达质粒小提试剂盒Р(2)DNA回收试剂盒:?天根生化琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒Р(Tiangel Midi Purification kit) (3)Lipofectamine2000脂质体转染试剂盒:Invitrogene公司(K一8生长曲线检测试剂盒:Dojindo Laboratories公司 Simply P总RNA提取试剂盒:BioFlux公司Р(4)Annexin v/PI凋亡检测试剂盒:BD公司Р14