有蛋白,22号管以后没有蛋白出现,最纯为16号管。结果说明了:13管可能存在有蛋白,14管以后到22号这一段都含有蛋白,可以进行检测,用于说明目的蛋白的存在。第二次电泳结果选用的是buffer,初提液,13管,混合液(14,15,16,17,18,19,20,21,22),第二次提取液结果表明:初提液中含有较多的杂蛋白,13管有蛋白出现,混合液中蛋白较为专一。3.2蛋白层析图谱4.总结与讨论采用DEAE阴离子柱层析和SephacryTMS-100分子筛层析进行蛋白质纯化,得到电泳纯的均一蛋白。通过本次的学习,了解到关于人亲环素的概念以及应用的方向,并且成功构建出了重组CyPA,经过诱导表达出了蛋白,并通过纯化,得到了更多的蛋白产物。在实验过程中也学习到很多实验操作技术,比如说电泳跑焦的前序准备工作其中使用到了细胞破碎仪,对于仪器的使用有了进一步的了解等。实验过程细致严谨的实验要求也让人受益匪浅。而且实验也能够成功地构建出了重组CyPA,经过诱导表达出了蛋白,通过纯化,得到了更多的蛋白产物。参考文献[1]郭敏杰,张晓滨,宓怀风.亲环素的研究进展[J].免疫学杂志,2004,20(4):321-327.[2](美)萨姆布鲁克(Sambrook,J.)等著,黄培堂等译.分子克隆实验指南[M],第三版,科学出版社2002 :1713-1720.[3]FischerG,BangH,MechC.BiomedBiochimActa,1984,43:1101.[4]HandsehumaeherRE,HardingMW,RiceJetal.Science,1984,226:544.[5]GalatA,MetCalfeSM.ProgBiophysMolecBiol,1995,63:67.[6]HeitmanJ,MovvaNR,HallMN.TheNewBiologist,1992,4:48.6
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