的物质的柱体,这些物质通过某种过程有选择地阻留了液体内的某些组分。”——马丁(A.J.P.Martin)(英)一、层析法的条件层析法应具备的因素或条件是:1.具有两相固定相——固定不动的一相流动相——即携带样品流过固定相的流动体。2.混合物中各组分的物理化学性质有差异3.多次展开6.1概述二、层析法的分类⑴根据层析机理不同的划分凝胶层析法——分配层析法——离子交换层析——吸附层析法——吸附剂为固定相,利用吸附能力强弱的差异来分离利用组分在固定相和流动相间分配系数的差异来分离离子交换剂作固定相,利用离子交换亲和力的差异来分离凝胶作固定相,利用对分子大小的筛分作用来分离⑵根据操作技术的划分低压层析技术中压层析技术高压层析技术电泳法——操作压力在0.5MPa-5MPa之间——操作压力在5Mpa-40MPa之间——操作压力小于0.5MPa——靠溶质分子在电场中的移动速度不同而分离二、层析法的分类⑶根据固定相的状态划分:柱层析法——固定相装填在金属或玻璃管中纸层析法——以滤纸为固定相进行层析薄层层析法——把吸附剂粉末铺成薄层作为固定相二、层析法的分类⑷根据流动相的物态不同的分类气相层析法液相层析法气-液层析法气-固层析法液-液层析法液-固层析法二、层析法的分类各种层析法的机理及优缺点类型机理优点缺点适用范围吸附层析化学、物理吸附操作简便易受离子干扰各种生物大分子的分离、脱色和去热源凝胶层析分子筛的排阻效应分辨力高,不会引起变性各种凝胶介质昂贵,处理量有限制分子量有明显差别的可溶性生物大分子分配层析溶质在固定相和流动相中分配系数的差异分辨力高,重复性较好,能分离微量物质影响因子多,上样量太小用于各种生物大分子的分析鉴定亲和色谱亲和色谱生物大分子与配体之间有特殊亲和力分辨力很高一种配体只能用于一种生物大分子,局限性大各种生物大分子聚焦色谱等电点和离子交换作用分辨力高进口试剂昂贵蛋白质和酶
全文预览
