凝胶渗透色谱法－有机分离分析

凝胶渗透色谱法的基本原理РVt=V0+Vi+VgРVt: 色谱柱总体积 V0: 载体的粒间体积?Vi: 载体内部的空洞体积 Vg: 载体的骨架体积Р体积排除机理Р溶剂分子: V0中的溶剂称为流动相; Vi中的溶剂称为固定相?高分子:1) 体积比孔洞尺寸大,淋出体积即为V0;? 2) 体积远小于所有孔洞体积,淋出体积即为V0 +Vi ;? 3) 体积中等,淋出体积则大于V0,小于V0 +Vi.Р二、凝胶渗透色谱法的基本原理РVe: 溶质的淋出体积;?K : 分配系数? (孔体积Vi中可以被溶质分子进入的部分与Vi之比)Р 特别大的溶质分子:Ve=V0,K=0;? 特别小的溶质分子:Ve=V0+Vi,K=1? 中等大小的溶质分子:V0 < Ve< V0+Vi,0 < K <1РVe=V0+KViРK =РVe - ViРViР溶质分子的体积越小,其淋出体积越大。这种解释不考虑溶质与载体之间的吸附效应以及在流动相和固定相之间的分配效应,其淋出体积仅仅由溶质分子尺寸和载体的孔尺寸决定,分离完全时由于体积排除效应所至,故称为体积排除机理。Р三、凝胶渗透色谱仪РGPC仪器主要由输液系统(柱塞泵)、进样器、色谱柱、检测系统(示差折光检测器、多波长UV、FTIR等)及数据采集与处理系统。Р三、凝胶渗透色谱仪РWaters 1515型凝胶渗透色谱仪Р四、载体和色谱柱РGPC 仪器对载体的要求:? 1.良好的化学稳定性和热稳定性;2.有一定的机械强度? 3.不易变形; 4.流动阻力小 5. 对试样没有吸附作用? 6.分离范围越大越好(取决于孔径分布)等? 7.载体的粒度愈小,愈均匀,堆积的愈紧密,色谱柱分离效率愈高。Р载体是GPC产生分离作用的关键РGPC载体的种类:? 1.交联聚苯乙烯凝胶? 2. 多孔性玻璃? 3. 半硬质及软质填料包括聚乙酸乙烯酯凝胶及聚丙烯酰胺凝胶? 4. 木质素凝胶等