第七章 化学检测ppt

3,5—二硝基水杨酸? 酚—硫酸法? 蒽酮法? 半胱氨酸—咔唑法Р化学法Р还原糖法Р碘量法Р比色法Р糖类检测的化学法Р6Р主要的糖类化学检测技术:? 1. 兰-爱农法? 2. 斐林试剂快速法? 3. 次碘酸钠法? 4. 铜试剂法? 5. 苯酚硫酸法? 6. 蒽酮硫酸法? 7. 3,5-二硝基水杨酸法(DNS法)Р7Р1.兰-爱农法Р此法以次甲基蓝为指示剂,直接用糖液滴定到斐林试剂中进行测定;? 或者将糖液加到斐林试剂中,再用标准葡萄糖液反滴定。又称置换法,直接滴定法或者次甲基蓝法。Р8Р1.1原理? 糖液滴到斐林试剂中时,还原糖中的游离羰基与酒石酸钾钠铜反应,使二价铜离子还原生成一价的氧化亚铜沉淀。? 由于次甲基蓝氧化能力比二价铜弱,当二价铜离子全部被还原后,过量一滴还原糖立即使次甲基蓝还原,溶液的蓝色消失,从而显示反应终点。Р9Р第一节糖类的化学检测Р还原糖的测定方法Р兰——爱农(Lane-Eynon)法:?①斐林试剂甲液:硫酸铜+次甲基蓝. ?②斐林试剂乙液:酒石酸钾钠+ NaOH + 亚铁氰化钾?③乙酸锌溶液?④亚铁氰化钾溶液?⑤葡萄糖标准溶液:准确称取经 98 ~ 100 ℃干燥至恒重的无水葡萄糖,加水溶解后移入1000 m1容量瓶中,加入5m1盐酸(防止微生物生长)。Р10Р第一节糖类的化学检测Р操作要点Р(1 )斐林试剂的标定?(a)标定预备试验? A、B各5mL+10mL水(250mL三角瓶中)摇匀,加热至沸腾,+2滴1%次甲基蓝溶液,用标准葡萄糖液滴定至蓝色消失,耗标准葡萄糖液(0.1%或0.2%)V1mL。?(b)标定? A、B各5mL+10mL水(250mL三角瓶中)摇匀,从滴定管中预先加入(V1-1)mL标准葡萄糖液,摇匀后加热加热至沸腾,+2滴1%次甲基蓝溶液,用标准葡萄糖液滴定至蓝色消失(滴定在1min内完成),记录消耗标准葡萄糖液的总毫升数V0