常用染色方法 4.曲霉菌属镜下形态和菌落特点 5.病例分析医学重要的霉菌分类合格痰标本分类细胞数/低倍视野 WBC 扁平上皮细胞 5>25 <10 4>25 10-25 ?含 1-2 种不同细菌,可考虑继续培养,结果可根据病情再作分析?超过 3种细菌,按不合格标本处理。中华检验医学杂志,2000,23(5):312 真菌标本的接种呼吸道标本,肺泡灌洗液无菌体液: (脑脊液、穿刺液、骨髓、玻璃体等) 无菌体液 1-5ml 打入真菌/分枝杆菌血培养瓶三区划线 28 ℃孵箱, 5天培养基用封口膜密封好怀疑生长缓慢菌(如组织胞浆菌),延长培养时间至 30 天。怀疑真菌生长, 点种真菌培养宜使用含和不含抗菌药物的两类培养基。经空气传播有高度感染性的真菌样品、含菌丝体的真菌应在生物安全柜内处理。若采用平皿培养,应封盖。 CNAS-CL42 : 2012 培养基选择沙保罗培养基 SDA 马铃薯培养基 PDA CHROMagar 念珠菌显色培养基?菌落形态(菌落大小、形态、色素、颜色和质地) ?显微镜下真菌孢子、菌丝、产孢等特征性结构进行初步判断真菌种属。?遇到疑难的丝状真菌,应请专业组内多名技术人员观看、讨论,以确定种属。?每次观察的菌落特征均需要记录、并照下显微镜下的形态特征和菌落。?参考图谱或网上咨询真菌培养物形态学鉴定菌落形态观察?酵母型菌落?类酵母型菌落?丝状型菌落(正、反) ?双相真菌显微镜检查?有隔或无隔?分支或不分支?有色或无色形态学鉴定常见显微镜检查方法? KOH 压片法(直接镜检) ?墨汁染色?乳酸酚棉兰染色?六胺银染色?革兰染色:回顾性看有利于诊断显微镜检查方法? KOH 压片:皮屑、毛发、指甲、脓液、痰等标本置于载玻片上,加一滴 10-20% KOH , 盖上盖玻片镜检,加热 30-60s ,镜检先低倍后高倍(在 KOH 中加入刚果红 1:1 ,更有利于真菌检测)
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