第三章常用的细胞化学染色方法Р一、概述?定义:细胞化学染色是细胞学和化学相结合而形成的一门科学。它以细胞形态学为基础,结合运用化学反应的原理对血细胞内的各种化学物质作定性、定位、半定量分析的方法。Р基本要求:原位显示细胞成分与结构Р二、细胞化学染色的基本步骤Р固定Р成色Р复染Р常用化学法固定,如甲醛、甲醇、乙醇、丙酮等。Р形成有色沉淀,显示出被检测的化学物质。反应种类:偶氮偶联、联苯胺、普鲁士蓝、雪夫试剂、钙钴沉淀Р核复染:苏木素、甲基绿、中性红、核固红、沙黄?浆复染:伊红、亮绿Р1、辅助判断急性白血病的细胞类型。?2、辅助血液系统疾病的诊断和鉴诊。?3、观察疾病疗效和预后。?4、发病机制的探讨。Р三、临床应用Р(一)过氧化物酶染色(peroxidase,POX) 【原理】Р方法:二氨基联苯胺法? POX ? H2O2 H2O+[O]? ? Р 二氨基联苯胺金黄色沉淀? -2HР【染色反应】Р阳性反应为蓝黑色颗粒,分布细胞的胞浆中。Р【结果判断】Р强阳性:颗粒粗大,密布于整个胞浆Р阳性:颗粒略粗,分布较密集Р弱阳性:颗粒小,分布稀疏Р阴性:无颗粒Р粒系:原粒Ⅰ型阴性,Ⅱ型阳性;早幼粒以下均呈阳性,随着细胞成熟度阳性反应程度逐渐加强。?嗜酸性分叶核粒细胞:阳性,颗粒更粗大。?嗜碱性分叶核粒细胞:阴性。Р【正常血细胞染色反应】Р单核系:原单阴性,幼单及成熟单弱阳性,阳性颗粒少,细小,大小不均,弥漫分布不均。?幼红、淋巴细胞、浆细胞、巨核细胞:阴性Р1、帮助鉴别急白类型首选?1) 急白类型鉴别?急性淋巴细胞白血病其阳性率<3%。?急粒阳性。Р【临床意义】Р3)急性早幼粒细胞白血病(强阳)与急性单核细胞白血病的鉴别。?4)急性单核细胞白血病与组织细胞白血病或恶组鉴别:急单时幼单和单核细胞呈弱阳性,异常组织细胞阴性。Р【临床意义】