血细胞形态学检验技能及临床意义浙江省人民医院检验医学中心吴茅1常规实验室制片、染色及镜检技术2(一)血涂片的制片要求:1、血涂片的制片要求血量速度角度厚薄贫血涂片红细胞增多的涂片32、推片的方法43、看细胞最适部位5(二)、血涂片显微镜检查要求选择制片染色良好的涂片待涂片干后先低倍下选择分片部位滴香柏油油镜下分类若用抗凝血推片,分类时要关注涂片尾部细胞若非抗凝血推片,分类时要关注涂片体尾部细胞6显微镜使用中注意的问题光源的调节聚光镜的使用双目镜的调节7(三)Wright-Giemsa混合染色液配制[试剂]1.Wright(瑞特)染色液瑞特染粉1g,置洁净干燥的研钵内,加甘油3~5ml,研磨片刻后,使瑞特染粉充分溶解,加甲醇50ml,继续研磨片刻后,收集上层染液。残余部分再加甲醇50ml研磨,再收集染液,重复几次后,用甲醇冲洗研钵,倒入同一瓶内,最后加甲醇至500ml。开始几周应经常振摇染液瓶。染色液存放时间越长,染色结果越佳。82.Giemsa(姬姆萨)浓缩染液将姬姆萨染粉3.8g放入甘油250ml中,置60℃水浴2h,溶解后加60℃预热的甲醇250ml混匀,于棕色瓶内室温保存,配后数天即可使用,可保存10年以上。93.磷酸盐缓冲液(pH6.4~pH6.8)KH2PO41.5g,Na2HPO41.0g,加蒸馏水到5L。4.姬姆萨稀释液取姬姆萨浓溶液50ml,加pH6.5磷酸盐缓冲液到500ml,混匀。此液为姬姆萨应用液,可直接作涂片复染用。5.简单的姬姆萨稀释液也可用市场上刘氏二液加自来水约3:100稀释后代用.10
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