分子诊断在感染性疾病中的应用

体:细菌、真菌、病毒、支原体、衣原体、螺旋体、寄生虫……? 条件致病菌Р微?生?物Р人Р体Р微?生?物Р人Р体Р不?同?的?感?染?状?态Р共?生?状?态Р在正常情况下,人体的一些腔道和体表均有微生物寄生Р感染性疾病的分子诊断策略Р一般性策略(检出病原体的DNA/RNA):?判断有无感染?是何种病原体感染?常用方法:PCR + 分子探针杂交?完整性策略?检出病原体?分型(分类)-亚型-耐药性?常用方法:杂交、PCR、基因芯片、DNA测序Р分子生物学检验技术在感染性疾病中的应用主要包括对病原生物进行鉴定、分型、耐药诊断和治疗过程中的疗效监测等?动态、定量地检测病原体核酸,能对疗效判断和病情预后评价提供客观的依据?目前已经应用于一些重要的感染性疾病,如结核病、病毒性肝炎、艾滋病、SARS、人禽流感等Р感染性疾病的分子诊断临床价值Р一、感染性疾病的诊断和治疗监测Р(一)结核分枝杆菌Р(二)肝炎病毒Р(三)人类免疫缺陷病毒Р(五)SARS冠状病毒Р(四)HPV病毒Р感染方式? 呼吸道、消化道或皮肤损伤侵入机体? 所致疾病? 疾病种类多样化? 以肺结核为主Р结核分枝杆菌(M.tuberculosis)Р生物学主要特点:?1.结核分枝杆菌细胞壁中含有大量脂质?2.引起的疾病都呈慢性,并伴肉芽肿?3.抗酸染色阳性Р结核分枝杆菌(M.tuberculosis)Р实验室诊断现状Р分子生物学检测方法Р近年来核酸扩增技术和杂交分析技术的发展,为分枝杆菌的检测、鉴定和药敏实验提供了极大的方便,可将诊断时间从几周降低到几天。?结核病基因诊断技术主要包括聚合酶链反应(PCR)、核酸探针杂交、DNA序列测定、基因芯片、基因分型等。Р现代分子生物学快速诊断Р基因结构Р分子诊断Р共价封闭环状结构? 标准株结核分枝杆菌? 基因组全长4.4kb,?包含4000个蛋白质编码基因?和50个RNA编码基因Р基因组特点