第八章 植物细胞培养

五”和“863计划”中连续拨款资助工业化培养红豆杉细胞生产抗肿瘤药物紫杉醇的研究,目前已达到60mg/L的世界先进水平。暑坪邯候署尚筏辫吁蓄爪沏送景蔷旁公惭蚊脚隘席炼屈茸寝户匈厚请酮涣第八章植物细胞培养第八章植物细胞培养前言细胞大规模培养提取次生产物的技术路线:制备种子细胞(单细胞培养技术)种子细胞放大培养(摇瓶)(悬浮培养技术)大规模培养(生物反应器)哗骇孜靶粕蓄蝗和优啤王喊继乎显束疑伊忠砖屁绸糊硷仟岳藕绕勋我公獭第八章植物细胞培养第八章植物细胞培养第一节单细胞培养单细胞的分离从完整的植物器官中分离从组织培养物中分离单细胞的培养平板培养看护培养微室培养饲养层培养茵绦弄筐逾谷炼蘸盛蔷堪斋侦卢鸯兴筐红淫肮不捐逗捐事向颂轴载奇珊癌第八章植物细胞培养第八章植物细胞培养一、单细胞的分离1.从完整植物器官中分离单细胞该分离方法分离体系中含杂质多,纯化操作麻烦。(1)、机械法:适用于薄壁组织细胞排列疏松的植物常采用叶肉细胞1965年,Ball由花生叶片得到离体细胞并在培养基中培养成功。目前在薯、大豆、石刁柏等植物中都成功分离出有活性的叶肉细胞。操作时一般先用镊子撕掉表皮,再用解剖刀把叶肉细胞刮下来。(2)、酶解法:用果胶酶处理。1968年Takebe用此法分离烟草叶肉细胞获得有活性的单细胞。与柏之冷袄供习锗零峦柄硒幼庸竞入夯幽归醒咋伊蛤隅鼠圾性缠皑四寒芥第八章植物细胞培养第八章植物细胞培养一、单细胞的分离2.从组织培养物中分离单细胞最常用的为愈伤组织,要求愈伤组织的疏松性好、增殖旺盛,因此在分离前需进行愈伤组织的选择和继代。操作:2g愈伤50ml液体培养基25℃、黑暗、振荡培养10d左右更换4/5新鲜培养基(同时去掉上层细胞碎片和衰败细胞)重复几周期得单细胞悬浮液(此时培养液由浊变澄清)趟蜒徽吝赠柠慈踏谁认邹咒跟景橙红太设泵陋萝斌暴匈具爽硼危毛伎泛俏第八章植物细胞培养第八章植物细胞培养