Р骨髓检查及细胞化学染色检验Р了解:?流式细胞仪的构造、原理、主要技术指标和临床应用。? 染色体分析在临床血液学中的应用。? 分子生物学检查在血液学中的应用。?常用FISH技术的种类、原理、方法和临床应用。?常用造血干/祖细胞培养的种类、原理和临床应用。?非显带染色体和显带染色体相关概念和技术。常见染色体数目和结构异常的有关概念和表示方法。核酸分子杂交技术原理和方法。聚合酶链反应原理和常用PCR产物检查方法。以PCR为基础的相关技术。基因芯片技术。?细胞凋亡概念,细胞凋亡形态学的基本变化及主要生物化学特征。细胞凋亡的机制。Р细胞化学染色检验Р细胞化学染色,是一种以细胞形态学为基础,结合运用化学反应的原理对血细胞内的各种化学物质作定位、定性及半定量分析的方法。Р细胞化学染色检验Р血细胞化学染色的基本要求是在原位显示细胞成分和结构,反应产物应是有色沉淀物,具有一定的稳定性。?血细胞化学染色可显示糖原、脂类、酶、蛋白质等。Р细胞化学染色检验Р临床意义?辅助判断急性白血病的细胞类型?辅助血液系统疾病的诊断和鉴别诊断?观察疾病疗效和判断预后?探讨某些疾病的发病机制Р一、过氧化物酶染色(POX)Р原理:?粒细胞和单核细胞胞浆中含有的髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)能将底物过氧化氢分解,产生新生态氧,它将四甲基联苯胺氧化为联苯胺蓝。联苯胺蓝自我脱氢氧化,显棕色四甲基苯醌二胺,再加入亚硝基铁氰化钠与联苯胺蓝结合,可形成稳定的蓝色颗粒,定位于细胞浆内酶所在的部位。РPOX结果判断Р细胞质内有蓝黑色颗粒者为阳性。?(-) 无颗粒沉着;(a)?(±) 颗粒细小,分布稀疏;(b)?(+) 颗粒较粗,局灶分布;(c) ?(++) 颗粒粗大,分布较密,占胞质 1/2~2/3 ;(d)?(+++) 颗粒粗大,呈团块分布;(e)?(++++) 全部胞质均部满颗粒,可覆盖胞核(f) 。
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