利用食用菌菌渣进行饲料发酵的研究

Р定磷试剂法РEDTA 络合滴定法Р食用菌菌渣进行饲料发酵的初步研究Р纤维素降解菌的筛选及酶活力测定Р纤维素降解菌的富集、分离及纯化Р1Р富集Р分离Р纯化Р称取50g木屑香菇菌渣加入250mL的三角瓶中,加入适量自来水,使其含水量达到60%左右,28~30℃培养20d。Р称取1g经富集的木屑香菇菌渣倒入含玻璃珠的99mL无菌水中,28℃下震荡均匀并浸泡1h,按照常规稀释分离方法,均匀涂布在羧甲基纤维素(CMC)培养基上,28~30℃恒温倒置培养,每个处理三个重复。Р待菌落长出后,根据各个菌落的形态特征点接至相应的常规培养基斜面上(牛肉膏-蛋白胨培养基、高氏一号培养基、PDA培养基),28~30℃恒温倒置培养,每个处理三个重复,进行多次转接,直到获得纯种。Р食用菌菌渣进行饲料发酵的初步研究Р纤维素降解菌的筛选及酶活力测定Р纤维素降解菌的筛选Р2Р初筛Р将纯化后的但菌落分别接种到纤维素刚果红培养基上28℃恒温倒置培养。Р复筛Р采用滤纸降解率法:待菌落长出后,挑选生长快、红色浓郁且水解圈大的菌落分别接种于细菌滤纸培养液、放线菌滤纸培养液、霉菌滤纸培养液中。细菌滤纸培养液置于37±1℃培养 2d;放线菌滤纸培养液和霉菌滤纸培养液中置于28℃培养 7d;然后将培养物连三角瓶一起烘干,每个处理三个重复,称取滤纸片的重量。滤纸降解率的计算公式如下:Р食用菌菌渣进行饲料发酵的初步研究Р纤维素降解菌的筛选及酶活力测定Р木屑香菇菌渣固体发酵Р3Р称取50 g粉碎的木屑香菇菌菌渣装入250mL的三角瓶中,121℃灭菌半小时,待其冷却至室温时,将筛选出来的细菌、放线菌、霉菌菌液分别接入三角瓶中,细菌组置于37±1℃ 140 r/min培养;放线菌和霉菌组置于28 ℃ 140 r/min培养 7d;细菌组每隔4 h取一次样,放线菌和霉菌组从第24 h开始每隔4 h取一次样称取1 g,4 ℃保存备用。