)检测技术蛋白(质)表达(Protein expression)免疫组织化学(IHC)…基因表达(mRNA/RNAexpression)反转录+荧光定量PCR(RT-qPCR)…FISH…DNA sequencing,ARMS…检测对象检测基因检测水平EGFR,KRAS,BRAF,BRCA, BCR-ABL,JAK2…EML4-ALK,ROS1,HER2,RET…BRCA1,TOP2A,TYMS…EGFR,EML4-ALK,HER2…?是RT-PCR平台上的特异扩增技术(易开展)?共发表300多篇文献?著名的大型临床研究- 如IPASS、INFORM等国际肺癌协会专家共识中国基因突变检测专家共识日本临床专家共识IPASSINFORM大型临床研究所采用ARMS技术——被临床证明的肿瘤基因突变检测技术DNA 基因重排融合mRNA或5’/3’mRNA差异表达嵌合蛋白表达肺癌中ALK基因变异的表达调控?FISH/CISH ?NGS?RT-PCR ?5’/3’比较qRT-PCR?RACE-PCR?…?IHC荧光原位杂交技术(FISH)●2个信号分离直径的要求,使实际应用中结果难以判断●有5-11%出现假阳性信号分离1,2,3●工作强度大,费时●主观性强,受人为因素影响大横向纵向1. FISH技术是美国药物临床试验中所采用的检测方法。2. 采用“分离”分析,基因倒位和ALK重排后,红色和绿色探针分开3. ≥ 15%的样本细胞中呈现分开的红色和绿色信号表示阳性结果1?操作简单,时间短?结果客观,易于判读,减少人为因素的影响?除FFPE样本外,还适用其他类型样本组织1?与EGFR、RET、ROS1等其他检测不冲突,共用相同组织切片和PCR扩增程序,节约有限资源和时间?中国荧光PCR仪器普及率更高,更加适合国情NTCPCFusionSample实时逆转录法(Real Time-PCR)
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