白细胞计数--Neubauer( 牛鲍)板计数法长治市第二人民医院检验科:薛彬彬?1、目的:掌握显微镜法白细胞计数的原理及方法。?2、原理:用白细胞稀释液将血液稀释一定倍数,同时破坏溶解红细胞。将稀释的血液注入血细胞计数板,在显微镜下计数一定体积的白细胞数,经换算即可求出每升血液中的白细胞数量。?3、器材:显微镜、改良牛鲍计数板、试管、吸管、微量吸管、吸头等。?4、试剂:白细胞稀释液: 2% 冰乙酸 2ml, 10g/L 结晶紫(或亚甲蓝) 3滴,加蒸馏水到 100ml 。?5、标本:新鲜全血或末梢血。?改良的牛鲍计数板。操作步骤?1、加稀释液:用吸管吸取白细胞稀释液? 0.38ml 于小试管中。?2、吸取血液:用微量吸管吸取新鲜全血或?末梢血 20ul ,擦去管尖外部?余血。将吸管插入试管中白?细胞稀释液的底部,轻轻放?出血液,并吸取上层白细胞?稀释液清洗吸管 2-3 次。?3、混匀:将试管中血液与稀释液混匀,待?细胞悬液完全变为棕褐色。?4、充池:再次将小试管中的细胞悬液混?匀,用微量吸管吸取 7ul 左右充?入改良牛鲍计数板的计数池中, ?室温静置 2-3 分钟,待白细胞完?全下沉。?5、计数:在低倍镜下计数四角 4 ?个大方格的白细胞总数。?6、计算: WBC=N/4 × 10 × 20 × 10 6 =N/20 × 10 9其中 N为4个大方格的白细胞总数。 7、细胞计数原则?大方格四边压线细胞数左不数右,数上不数下, ?弓形移动