稀释液的两个试管中,外观应为均匀淡红色,无絮状物和血块。2.血清标本的制备:采集被检对象静脉血,放入含兔脑粉或其它促凝剂的试管中,10分钟后离心,取上清;或者静脉血采入无抗凝剂试管中,4℃放置12小时,或37℃放置2小时后离心,2000r/min,10分钟,取上清(该上清不得有絮状物或沉淀)。二、操作步骤1、将准备好的抗人球交叉配血卡做好标记。2、将受血者血清1滴(或50μl)与献血者红细胞1滴(或50μl)加入主侧管中。3、将受血者红细胞1滴(或50μl)与献血者血清1滴(或50μl)加入次侧管中。4、加样后的试剂卡,置37℃中孵育15分钟。5、使用专用离心机离心5分钟,900rpm2分钟,1500rpm3分钟,取出肉眼观察结果。三、结果判定:1、阴性结果:红细胞完全沉降于凝胶管底部,表明受血者与献血者血型相合。2、阳性结果:红细胞凝集块位于凝胶表面或凝胶中,表明受血者与献血者血型不相合。四、注意事项1、应用直接抗人球蛋白微柱凝胶免疫试验检测病人红细胞时,一定要用适量EDTA的试管采血液标本,该标本不能放入4℃-10℃冰箱保存,以避免红细胞在病人体外致敏所致假阳性反应。2、红细胞标本一定不能被细菌污染,否则出现假阳性反应。尽可能应用当日采集的新鲜血做本试验。3、血清标本:血清标本必须充分去纤维蛋白,否则标本中纤维蛋白在微柱凝胶中析出,阻碍阴性红细胞沉淀,呈假阳性反应。4、如在微柱凝胶管中出现溶血现象,强烈提示为红细胞抗原抗体阳性反应,也不排除其他原因所致溶血,故对此标本一定认真分析,并向上级主管技术人员报告并讨论其原因。5、每日试验前,先取出微柱凝胶卡放置至室温。6、红细胞悬液的浓度控制在0.8%-1%之间。7、试剂卡应放在18-25℃储存,如若长期放在4℃冰箱,建议每1-2个月取出,用专用离心机离心一次,以防止干胶或产生气泡。五、新生儿溶血病检测卡标准操作程序(SOP)
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