蛋白组学的研究[36,37] ,但药物游离浓度测定方面鲜有报道。本文第二部分通过对超滤法和溶剂沉淀法( 分别采用冰丙酮[38,39] 、冰乙醇[40-43] 、三氯乙酸[44,45] 三氟乙酸[46-48] 为沉淀剂)沉淀蛋白测定游离五聚赖氨酸-2- 羰基酞菁锌( ZnPc-(Lys) 5 )浓度的方法进行了比较,并报道了 ZnPc-(Lys) 5 与血浆蛋白的结合率。为进一步检测体内有效血药浓度和制定合理的给药方案奠定基础。在药物分析研究中,生物样品一般具有待测药物浓度低、内源性杂质多等特点, 因此在进行药物分析研究时所采用的分析方法必须具备高灵敏度、高选择性、较宽的线性范围以及良好的精密度和准确度。高效液相色谱法( HPLC )为一高效、快速的分离、分析技术,具有灵敏度高、选择性好的特点,在药物分析中应用极广。 HPLC 具有的同时分离和分析的能力对于体内药物分析尤其重要。色谱分离后排除了诸多内源性杂质干扰,大大提高了分析测定的选择性和准确性。由于使用各种高灵敏度的检测器,结合许多衍生化技术及样品富集技术, HPLC 更适合于一些微量成分甚至痕量成分的分析[49] 。目前国内外有关酞菁类光敏剂在生物样品中的分析检测方法鲜有文献报道[50-53] , 文中指出由于酞菁类光敏剂结构上的特点导致使用 HPLC 法进行分析存在诸多困难,一是酞菁化合物存在大π键极易发生轴向聚集;二是为了改进酞菁的高度憎水性,常取代氨基或季铵基等极性侧链基团,极易与色谱柱固定相中未被饱和的羟基发生共价结合而难以洗脱;三是对于金属配位的酞菁类光敏剂,尤其是配位具有闭壳层的金属离子的酞菁类光敏剂如酞菁锌, 由于其与流动相的配位作用,使其在反向色谱柱中几乎不保留。本文第三部分通过对血浆样品预处理方法和色谱条件的筛选,建立了一种灵敏、准确,适合于血浆中 ZnPc-(Lys) 5 浓度测定的高效液相色谱法。
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