蛋白与操纵基因的亲和力,不能与操Р纵基因结合,于是 RNA 聚合酶结合于启动子,并顺利地通过操纵基因,进行结构基Р因的转录,产生大量分解乳糖的酶,这就是当大肠杆菌的培养基中只有乳糖时利用乳Р糖的原因。Р当向乳糖培养基中加入葡萄糖时, 造成 cAMP 浓度降低, CAP 便不能结合在启动Р子上。此时即使有乳糖存在,?RNA 聚合酶不能与启动子结合,虽已解除了对操纵基Р因的阻遏,也不能进行转录,所以仍不能利用乳糖。Р8.DNA 复制的过程。РDNA 复制时子链双链中有一条来源于母链, 以 DNA 母链双链为模板合成子链时 ,Р其中一条子链的合成是不连续的?,而另一条链的合成是连续的。 随后链是指以冈崎片段Р合成的子链。 DNA 聚合酶Ⅲ全酶合成先导链的同时也合成随后链。当大约?1000 个核Р苷酸加在随后链上之后,随后链的模板就离开,然后再形成一个新的环,引物酶再合Р成一段 RNA 引物,另一冈崎片段再开始合成,这样使两条链同时同方向合成。已合Р成的冈崎片段由 DNA 聚合酶 I 发挥 5'、3'核酸外切活性从 5'端除去 RNA 引物,并用Р脱氧核苷酸填满形成的缺口,最后由?DNA 连接酶将各片段连接起来,形成完整的随Р后链。Р三、论述题(每小题 12,共 24 分)Р1.生物大分子制备的基本操作步骤?Р材料的选择和预处理→细胞的破碎→提取→纯化→浓缩→结晶、干燥→保存Р2.简要说明 DNA 重组技术的基本过程?Р?DNA 重组技术是运用多种限制性内切酶和 DNA 连接酶等,在细胞外将一种外源Р基因 DNA( 来自原核或真核生物 )和载体 DNA 重新组合连接 (重组 ),形成杂交 DNA 。Р最后将杂交 DNA 转入宿主生物 (如大肠杆菌 )。使外源基因 DNA 在宿主生物细胞中,Р随着生物细胞的繁殖而增殖,或最后得到表达。最终获得基因表达产物或改变生物原Р有的遗传性状。
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