行1次或按照仪器制造商的推荐周期执行，具体操作方法如下：(1 ) 光路电压：Р采用未加抗体但经溶血素裂解的新鲜全血标本调整光电倍增管(PMT)电 压。未染色淋巴细胞的自发荧光应完全在阴性区域，所使用的检测通道内荧 光直方图的淋巴细胞阳性率＜2%,双荧光散点图内的未染色细胞位于散点图 的左下象限内。Р保持与检测临床标本时相同的PMT电压设置，用已知相对荧光强度的 荧光微球上机测定，如仪器厂商提供的标准品。通过连续5 d共20次的重 复测定得到每一种荧光微球的可接受平均荧光强度范围。要求每一种荧光 微球的平均荧光强度检测值，其相关系数应》0.98。在仪器PMT电压不变 的情况下，各种荧光微球的荧光线性、平均荧光强度差异应保持不变。荧 光线性图的绘制遵从制造商的建议。РРР(2 )溶血:РР(2)弱表达和自发荧光：Р评估标准品或校准品或细胞对弱表达荧光与自发荧光的区分能力。Р确定峰间最小的可接受数据，监测此差异并校正任何日常偏差。Р•调整荧光补偿：Р(1)目的:РР当采用两种及以上抗体组合方案进行CD34+细胞计数时，或当光学检 测通道的电压及增益发生变动时，或当仪器维修保养后，都需要进行荧光补 偿调整。Р(2)方法:Р荧光补偿调整方法包括两种，即手工方式和软件自动补偿方式。具体 实 施方法如下：选择与最强荧光信号相匹配的补偿试剂，如CD8在淋巴细胞 上表达很强，因此，可以采用CD8-PE. CD8-FITC用于PE和FITC通道的 荧光补偿。调节补偿采用的标本可以是细胞或者商品化的补偿荧光微球。 三色抗体组合分析时，需要4个单标记标本管调整补偿，包括无直标抗体 标本管、仅含FITC直标抗体阳性标本管、仅含PE直标抗体阳性标 本管、 仅含策三种直标抗体阳性标本管。Р•性能评估：Р每个实验室需要建立评估准确度、特异度、灵敏度和精确度的办法和 标准。Р(1 )准确度：Р(2 )溶血:
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