量成正比,所以G-C含量最高的,Tm值应最高。Р(四)判断题Р1.对。生物体内的负超螺旋DNA容易解链,便于进行复制、转录等反应。Р2.对。因为RNA有局部双螺旋结构,变性之后形成单链状,所以有增色效应。Р3. 错。双螺旋内部碱基对与碱基对间是重叠的电子云,水分子无法进入。Р4.错。真核生物的结构基因中包括内含子和外显子,经转录、加工后只有外显子部分翻译成蛋白质,与蛋白质氨基酸序列相对应。Р5.对。可以减弱核苷酸链之间的磷酸基之间的排斥作用,从而使其分开更难,Tm升高。Р6.对。RNA可形成局部双螺旋,两链之间是反向平行的。Р(五)分析计算题Р1.(1)两条反向平行的多核苷酸链围绕同一中心轴相互缠绕形成右手螺旋;(2)嘌呤和嘧啶碱位于双螺旋的内侧,磷酸和核糖在外侧,彼此通过3′,5′磷酸二酯键相连接,形成DNA分子的骨架。碱基平面和纵轴垂直,糖环的平面则和纵轴平行;(3)双螺旋的平均直径为2nm,两个相邻的碱基对之间相距的高度,碱基堆积距离为0.34nm,两个核苷酸之间的夹角为36度;(4)两条核苷酸链依靠彼此碱基之间形成的氢键相联系而结合在一起;两条链的碱基按碱基配对原则配对,即A对T,G对C。(5)碱基在一条链上的排列顺序不受任何限制。Р2.DNA的变性从开始解链到完全解链,是在一个相当窄的温度范围内完成的,在这一范围内,紫外线吸收值的增加量达到最大增加量的50%时的温度为DNA的解链温度(溶解温度,melting temperature,Tm)。Tm值大小主要与GC含量有关,GC含量越高,Tm值越大;另外核酸分子越大,Tm值也越大,溶液pH值大于11.3,核酸完全变性,小于5.0则核酸容易脱嘌呤。降低溶液的离子强度会使Tm值下降,尿素等变性剂也会使Tm值下降。在实验中,Tm值计算公式:Tm=69.3+0.41(G+C%),小于20bp的寡核苷酸:Tm=4(G+C)+2
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