时间1・5h,过滤,回收乙醇,样品定容为25ml。分别测定样品中水蛭素含量。水蛭素的测定可依据其与凝血酶按1:1结合的原理,采用以上方法测得。1.2.3温度条件的选择由于水蛭素只能在80°C下稳定存在15min,所以在选取温度时,应尽量避免温度过高造成水蛭素失活。所以本实验选用在50°C,60C,70°C下分别进行。称取水蛭粗粉10g,采用70%的乙醇于3个温度各提取1・5h,并采用同样的方法测定水蛭素含量。1.2.4提取时间的选择称取水蛭粗粉10g,用70%的乙醇,在60°C下分别提取1h,1.5h,2h。分别测定提取样品的水蛭索含量。2.1乙醇浓度的选择从表1的数据可以看出,不同浓度的乙醇对水蛭的提取效果有较大的影响。从水蛭索的含量来看,随乙醇浓度的提高,其含量不断增加,在70%~80%的乙醇浓度下,获得较好的捉取效果。由于水蛭素是一种可溶于水和乙醇等冇机溶剂的蛋白质,所以综合两种因素考虑,70%〜80%的乙醇浓度是较好的提取浓度。表1不同浓度乙醇的提取结果2.2提取温度的选择见表2。表2不同温度的提取结果2.3提取时间的选择见表3。表3不同提取时间的提取结果3小结本实验过程利用了水蛭素和凝血酶1:1的配比关系,测定不冋条件水蛭提取液的水蛭素含量,确定了水蛭工业提取的最佳条件。实验结果表明,乙醇浓度在70%〜80%之间,温度在60°C左右,提取时间1.5h会达到较好的提取效果。【参考文献】1国家药典委员会•中华人民共和国药典•北京:人民卫生出版社'2005‘57.2郭义明,胡於鲁,王庭力,等•水蛭有效成分提取的初步探讨•中国海洋约物,1993,1(45):40・41.3王于杰,陈劲春•两种新型抗血栓药物■水蛭索与水蛭肽•科技情报开发勻经济,2000,10(5):60-61.4欧兴长,丁家欣,张玲,等•水蛭素的硏究槪况•中国药学杂志,1991,26(7):396-399・
全文预览
