变用生物信息学方法对其进行氨基酸保守性分析和空间结构的预测;此外,建立永生淋巴细胞系进行细胞功能学研究。本研究将有助于我们进一步理解视神经萎缩的发病机制,从而为疾病的遗传咨询、产前诊断以及临床防治提供理论基础。对提高患者的生活质量、减轻社会负担,具有重大的社会效益。本课题的研究结果预计能够在国内外重要学术刊物上发表论文1-3篇,同时可在本院建立一支团结互助、高素质、高水平的研究队伍,这不仅可以提高我院对遗传性疾病研究的整体水平,也可提高我市及至我国在视神经萎缩等相关领域的研究水平。五、研究方案、技术路线、组织方式与课题分解(一)本课题的研究方案如下:视神经萎缩家系的收集:本院通过与北京、福建以及全国各地其他医院的合作,预计收集到100个明显具有常染色体显性遗传特征的视神经萎缩家系。OPA1全基因组分析:在所收集的视神经萎缩病例中,我们对有明显常染色体显性遗传特征以及不携带三个LHON相关mtDNA原发位点的家系进行OPA1基因突变热点区(外显子8,9,12和27)筛查。对携带OPA1基因新突变的重点家系进行详细的临床和遗传学研究。认真阅读并签署知情同意书后,详细了解患者及亲属相关资料(包括姓名、性别、出生日期、籍贯、发病年龄等),然后,对其进行相关的眼科学检查:视力(发病时视力和现在视力),视野检查,色觉检查,眼底摄影,视觉诱发电位(VEP),并采集静脉血3ml,EDTA抗凝,-20℃冰箱保存备用。酚/氯仿法提取患者及其家系成员全血DNA,紫外分光光度计DU-800测定DNA浓度,对OPA1基因进行PCR扩增(引物参照PeschUEetal),纯化,测序,与标准序列(NM_015560)比对,绘制中国人群中OPA1基因突变谱。生物信息学分析:对发现的新突变通过生物信息学方法进行氨基酸保守性分析以及蛋白空间结构预测,进一步阐述视神经萎缩发生、发展的可能机制。氨基酸保守性分析:
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