大曲检验方法(洋河酒厂)

.5.1 固体曲浸出液的制备Р根据测得的试样水份,计算10.00g绝干固体曲的试样量。称取该量试样,置于250mL烧杯中,根据试样水份计算应加水量,将水温调至30℃,加入烧杯中。再加入10.0mL醋酸-醋酸钠缓冲溶液,使固体曲的试样按绝干物质计为10.00g/100mL,充分搅匀,置烧杯于35℃恒温水浴中保温60min,保温期间每隔15min搅拌一次。浸出液用脱脂棉或多层纱布过滤。滤液应尽快测定,不宜放置。如果在1h内无法测定,可将浸出液暂置冰箱中冷藏,测定时应升至35℃后使用。(稀释至被试液吸光度值在0.25-0.40范围内)。Р3.8.5.2 测定Р a.先将酪氨素溶液放入(40±0.2)℃恒温水浴中,预热5min。Р b.按下列程序操作:Р试管A(空白) 试管B(酶试样,需做3个平行试样)Р ↓↓Р加酶液1.00mL 加酶液1.00mLР ↓(40±0.2)℃,2min ↓(40±0.2)℃,2minР加三氯乙酸2.00mL(摇匀) 加酪素1.00(摇匀)Р ↓(40±0.2)℃,10min ↓(40±0.2)℃,10minР加酪素1.00(摇匀) 加三氯乙酸2.00mL(摇匀)Р ↓↓Р取出静止10min,过滤取出静止10min,过滤Р ↓↓Р取1.00mL滤液取1.00mL滤液Р ↓↓Р加碳酸钠溶液5.0mL 加碳酸钠溶液5.0mLР ↓↓Р加福林试剂1.00mL 加福林试剂1.00mLР ↓(40±0.2)℃显色↓(40±0.2)℃显色Р于680nm波长,用10mmm比色皿于680nm波长,用10mmm比色皿Р测其吸光度测其吸光度Р3.8.5.3计算РX=A×K×4/10×n=2/5×A×K×nР式中: X—样品的酶活力(u/g或u/mL)Р样品平行试验的平均吸光度РK—吸光常数Р4—反应试剂的总体积(mL)Р10—反应时间10min,以1min计РN—稀释倍数