解度差异②化学反应:为提高富集的效果,可使待富集成分在内水相发生化学反应以降低其浓度,促使迁移不断进行。③萃取和吸附(2)有载体液膜的分离机理——“载体输送”第七章色谱分离1.色谱分类两相分子的聚集状态分:液相,气相,超临界流体色谱固定相的形状分:柱色谱纸色谱薄层色谱按分离机制分:分配色谱:利用分配系数的不同吸附色谱:利用物理吸附性能的差异离子交换色谱:利用离子交换原理空间排阻色谱:利用排阻作用力的不同2.凝胶色谱:分离机理、分配系数的讨论、应用(主要:脱盐、分离、测分子量)定义:以多孔性凝胶填料为固定相,按分子大小顺序分离样品中各个组分的液相色谱方法分离机理:小分子量的化合物可以进入孔中,滞留时间长;大分子量的化合物不能进入孔中,直接随流动相流出。分子大小介于二者之间的分子在流动中部分渗透,渗透的程度取决于它们分子的大小,流出的时间介于二者之间.分配系数:Ve=Vo+KdViKd=(Ve-Vo)/Vi当分子的Kd=0时,Ve=Vo即该分子被完全排阻于凝胶颗粒之外,全部分布于流动相里,固定相里分布为零(A);当分子的Kd=1时,Ve=Vo+Vi即该分子完全不被排阻,均匀的分布在流动相和固定相里,两相比值为1(C);当0<Kd<1时,Ve=Vo+Kd*Vi即表明分子受到部分排阻(B)。3.分配色谱机理(正相色谱和反相色谱)定义:是基于样品分子在包覆于惰性载体(基质)上的固定相液体和流动相液体之间的分配平衡的色谱方法正相HPLC?极性:固定相>流动相固定相-极性强流动相(己烷,庚烷)-极性弱极性物质后出峰反相HPLC极性:固定相<流动相固定相-极性弱流动相(甲醇,乙腈等)-极性强极性小物质后出峰4.离子交换色谱:离子交换树脂的组成;应用机理:树脂上可电离离子与流动相中具有相同电荷的离子及被测组分的离子进行可逆交换而分离。组成:骨架功能基团活性离子(或可交换离子)应用:软水制备:
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