含目的基因的农杆菌感染番茄原生质体后,可用含有________的培养基进行筛选,与此同时,为能更好地达到培养目的,还需在培养基中加入________。培养24~48h后取样,在质量分数为25%的蔗糖溶液中,观察细胞________现象来鉴别细胞壁是否再生。Р(3)由于导入的目的基因能转录反义RNA,且能与________互补结合,抑制PG基因的正常表达。若转基因番茄的保质期比非转基因番茄________,则可确定转基因番茄成功。Р(4)获得的转基因番茄产生的种子不一定保留目的基因,科研人员常采用________方法使子代保持转基因番茄的优良性状。Р[答案] (1)①反转录②RNA聚合酶如下图所示Р③使目的基因随质粒的复制而增加Р(2)卡那霉素适量植物激素是否发生质壁分离Р(3)天然PG基因转录的mRNA 长Р(4)无性繁殖(或植物组织培养)Р[解析] (1)①由mRNA获得DNA的过程为反转录。②通过反转录得到的目的基因不含RNA聚合酶结合位点,为了保证转录的正常进行,需要在基因的上游添加RNA聚合酶结合位点。目的基因两端均有该限制酶识别的序列,所以酶切后的目的基因两端都有黏性末端。③可以利用PCR技术对目的基因进行扩增,也可以将重组质粒导入细菌中进行扩增。(2)可利用标记基因对基因的导入结果进行检测。植物激素是植物组织培养中不可缺少的组分。(3)因目的基因转录得到的是反义RNA,与天然PG基因转录得到的RNA可以互补配对,从而抑制正常的翻译过程。(4)由图示可知,目的基因整合到了细胞核染色体上,故获得的转基因植株相当于杂合子,有性生殖产生的后代不一定带有目的基因,可以利用无性繁殖技术确保子代保持转基因番茄的优良性状。Р23.(10分)农杆菌是一种在土壤中生活的微生物,能在自然条件下感染植物,因而在植物基因工程中得到了广泛的运用。下图为农杆菌转化法的示意图,试回答下列问题:
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