放一个有色溶液的玻璃皿,则通过棱镜后的光谱上会出现一处或几处暗带,这种带有暗带的光谱称为该有色溶液的吸收光谱,吸收光谱显示该溶液对光的选择性吸收的特性。溶液所呈现的颜色是它的吸收光谱中透过最多、吸收最少的那部分波长光线的颜色,而暗带部分则是它透过最少、吸收最多的那部分波长光线的颜色。Р不同分子的原子团和原子,它的发射光谱和吸收光谱不同。因此可以根据其光谱的特征和强度研究化合物的结构和测定其含量,称为光谱分析法,这也是比色分析的原理。根据发射光谱分析的如火焰发射光谱法(又称火焰光度法,分析钠、钾、钙),荧光光度和荧光分光光度法(根据荧光的发射强度进行分析)。Р根据吸收光谱分析的方法又称吸光光度法,如应用可见光的吸收光谱进行分析的普通的分光光度计和分光光度法;用紫外光的吸收光谱进行分析的叫紫外分光光度计和紫外分光光度法;用原子的吸收光谱进行分析的方法叫原子吸收分光光度计和原子吸收分光光度法。Р2.2.2 紫外可见分光光度法定量基础Р当一束单色入射光[ I0]通过厚度为L、浓度为C的有色溶液后,所透过光的强度[ I1 ]与溶液厚度L及浓度C成负指数乘积的关系:I1=I0·10-K·L·C 如果物质在溶液中的浓度和显色强度成正比,则可以应用郎伯-比尔定律通过比色方法从显色强度求浓度,这是比色分析的原理。I1=I0·10-K·L·C移项成:I1/I0=10-K·L·C 式中K为常数,可因物质的吸光特性和采用单色光的波长不同而有所不同,与溶液的厚度和浓度无关。上式写成以10为底的对数,log(I1/I0)=-K·L·C,再以透光度T=I1/I0时,则上式成为logT=-K·L·C或者-logT=K·L·C。I1/I0称为透光度或透光率,表示透过光强度是入射光强度的百分之几,其数值只能<1,从0~100%。为了方便起见,经常用透光度的负对数-logT来表示溶液吸收光线的情况,并称为吸光度
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