号平行6份,制成供试品溶液,测定峰面积并计算浓度,丹参素钠和丹酚酸B的RSD分别为2.0%,0.58%。Р 2.7 稳定性实验取正交实验2号样品,分别于0,2,4,8,10 h测定丹参素钠及丹酚酸B峰面积并计算浓度。丹参素钠和丹酚酸B的RSD分别为3.14%,0.93%。结果表明样品在10 h内稳定。Р 2.8 加样回收率实验取已知含量的供试品溶液,分别添加丹参素钠及丹酚酸B对照品溶液,同法制备成供试品溶液并按上述色谱条件测定其丹参素钠及丹酚酸B浓度,计算加样回收率为分别为97.1%,98.1%。结果表明,本法具有良好的回收率。Р 2.9 正交实验设计与结果采用正交实验法,选取溶剂(A)、溶剂加入量(B)、提取时间(C)、提取次数(D)等4个因素进行考察,各因素为3水平。实验因素与水平见表1,正交实验结果及方差分析见表2~3。表1 丹参酸提取实验影响因素与水平(略)表2 L9(34)正交试验结果(略)表3 方差分析(略)Р 表2及表3显示,以丹参素钠与丹酚酸B含量之比为考察指标,4个因素的影响大小依次为A B C D;方差分析表明只有溶剂因素对该指标的影响有显著性意义。从专业上看最佳条件为A3B2C1D3,即5 g丹参粉,加入到4%盐酸50 ml中,回流加热煮沸30 min,提取3次。2.10 重复验证实验准确称取10 g丹参粉,按照A3B2C1D3最佳条件重复实验3次。结果见表4。实验结果表明本次实验得到的最佳组合条件与试验结果一致,可实际应用。表4 重复验证实验结果(略)Р 3 讨论Р Р 采用传统的水煎煮法或回流提取法制备的丹参水提液中,丹参素的含量较低,丹酚酸B的含量则较高,因此不能制备出二者含量相当的提取液。本研究创新之处在于采用酸回流提取的方法,分解一定量的丹酚酸B,使丹参素的含量较水提取增加3倍左右,最终与丹酚酸B含量相当,从而达到防治骨质疏松的最佳药效。Р【
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