种接种琼脂斜面上,适宜温度下培养适宜时间,用无菌接种环轻轻刮取菌苔,并通过接种环与试管壁之间的轻轻摩擦使菌种充分扩散到无菌水中,调证菌液浓度,向已制备好的菌悬液加入等体积的Р20%无菌甘油,轻轻振试管管,使内容物充分混合,分装于无菌小管。甘油冷冻管最好在-30 ℃贮存。Р沙管保藏法Р制备沙管Р培养接种Р制备菌悬液Р混菌Р干燥Р保藏Р适合保藏芽孢杆菌、梭菌、放线菌和一些丝状真菌。Р土壤保藏法Р用土壤替代沙管保藏法中的河沙,其余操作与沙管保藏法相同Р适合保藏土壤细菌、放线菌和丝状真菌,时间为2~6年。Р硅胶保藏法Р用硅胶替代沙管保藏法中的河沙,其余操作与沙管保藏法相同Р适合保藏酵母菌和某些丝状真菌Р滤纸保藏法Р保藏微生物细胞或孢子的载体为滤纸。Р对细菌、酵母菌、丝状真菌等都有一定的效果,有些菌种最长可达17年。Р明胶片保藏法Р制备无菌营养明胶Р制备无菌石蜡滤纸Р微生物培养并制成浓厚的悬液Р在悬液中加入营养明胶Р将含微生物细胞或孢子的营养明胶滴于石蜡滤纸表面Р干燥Р将形成的明胶片密封保藏Р麸皮保藏法Р我国历史悠久的微生物保藏法Р适于保藏根霉、曲霉、青霉、红曲霉等属和赤霉菌Р梭氏真空干燥保藏法Р在小试管中放置菌悬液Р小试管在大试管中放置Р大试管在真空状态下干燥Р密封大试管Р液体直接干燥保藏法Р需要加入保护剂Р干燥之前不需冻结Р在干燥过程中为增大蒸发面积,可加入多孔材料Р干燥后的容器应熔封Р蒸馏水保藏法Р最为简便的微生物保藏法Р微生物细胞或孢子保藏在蒸馏水中Р保藏的容器应密封Р适于保藏棒状杆菌、土壤杆菌和假单孢菌等Р液氮冰箱超低温保藏法Р需专用设备-液氮超低温冰箱Р菌悬液密封于安瓿管内,控速冻结Р国外已普遍采用Р保藏时间长Р冻结真空干燥保藏法Р历史悠久,又称冻干法Р不产生孢子只产生菌丝体的丝状真菌不宜采用该法Р适用面广Р保藏时间可达10年以上Р多为菌种保藏机构采用Р冻结真空干燥保藏法
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