此标准液中每毫升含脯氨酸100μg。Р (2)系列脯氨酸浓度的配制Р 取6个50ml容量瓶,分别盛入脯氨酸原液0.5,1.0,1.5,2.0,2.5及3.0ml,用蒸馏水定容至刻度,摇匀,其每瓶的脯氨酸浓度分别为1,2,3,4,5,及6μg/ml/Р (3)取6支试管,分别吸取2ml系列标准浓度的脯氨酸溶液及2ml冰醋酸和2ml酸性茚三酮溶液,每管在沸水浴中加热30分钟。Р (4)冷却后向各试管准确加入4ml甲苯,振荡30秒钟,静置片刻,使色素全部转至甲苯溶液。Р (5)用注射器轻轻吸取各管上层脯氨酸甲苯溶液至比色杯中,以甲苯溶液为空白对照,于520nm波长进行比色。Р (6)标准曲线的绘制:先求出密度(y)依脯氨酸浓度(x)而变的回Р归方程式,再按回归方程式绘制标准曲线计算2ml测定液中脯氨酸的含量(μg/ml)。Р 2. 样品的测定Р (1)脯氨酸的提取:准确称了以不同处理的待测植物叶片各0.5g,分别置大试管中,然后向各管分别加入5ml3%的磺基水杨酸溶液,在沸水浴中提了以10分钟,(提取过程中要经常摇动),冷却后过滤于干净的试管中,滤液即为脯氨酸的提取液。Р (2)吸取2ml提取液二另一干净的带玻璃试管中,加入2ml冰醋酸及2ml酸性茚一桐试剂,在沸水浴中加热30分钟,溶液即呈红色。Р (3)冷却后加入4ml甲苯,摇荡30秒钟,静置片刻,取上层液至10ml离心管中,在3000μm下离心5分钟。Р (4)用吸管轻轻吸取上层脯氨酸红色甲苯溶液于比色杯中,以甲苯溶液为空白对照,在分光光度计上520nm波长处比色,求得光密度。Р (四)结果计算Р 根据回归方程计算出(或从标准曲线上查出)2ml测定液中脯氨酸的含量(Xμg/2ml),然后计算样品中脯氨酸含量的百分数。计算公式如下:Р 何意义? (五)问题:比较干旱、低温和正常生长条件下的植物体内脯氨酸的含量。测定脯氨酸含量有
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