受体α- 链的 mRN A 的多变性进行了分析。先可用于 T 细胞、肿瘤及其它部位抗体基因的研究。 12 、什么是不对称 PCR ?应用于怎样的研究? 答: 用不等量的一对引物, PCR 扩增后产生大量的单链 DNA(SSDNA). 这对引物分别称为非限制引物与限制性引物,其比例一般为 100 ∶1。得到单链,更适宜测序,单链还可作为探针。 13 、什么是表达子 PCR? 应用于怎样的研究? 答:引入酶切位点,将 PCR 产物克隆;引入噬菌体启动子,制备单链探针。 14 、什么是反向 PCR ?应用于怎样的研究? 答: PCR 只能扩增两端序列已知的基因片段,反向 PCR 可扩增中间一段已知序列, 而两端序列未知的基因片段不扩增。反向 PCR 的目的在于扩增一段已知序列旁侧的 DNA ,也就是说这一反应体系不是在一对引物之间而是在引物外侧合成 DNA 。 15 、什么是原位 PCR? 应用于怎样的研究? 答:就是在组织细胞里进行 PCR 反应,它结合了具有细胞定位能力的原位杂交和高度特异敏感的 PCR 技术的优点。原位 PCR 既能分辩鉴定带有靶序列的细胞, 又能标出靶序列在细胞内的位置, 分子和细胞水平上研究疾病的发病机理和临床过程及病理的转归有重大的实用价值。 16 、什么是 RAPD ?应用于怎样的研究? 答: RAPD 即随即扩增多态 DNA 分析: 两个物种的个体之间, 亲缘关系越近其相应 PCR 扩增的带型就越相似,繁殖差异悬殊,利用这种原理的技术成为 RAPD , 应用于生物多样性分析。( 单个人工合成的随机多态核苷酸序列为引物)。第三章核酸分析与合成 3 、末端终止法进行 DNA 测序的原理。答: DNA 链中核苷酸以 3’,5’- 磷酸二酯键连接, 合成 DNA 所用的底物是 2’- 脱氧核苷三磷酸。2’,3’ ddNTP 与普通 dNTP 不同, 它们在
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