匀,使之成1.5IU/ml浓度胰岛素应用液。)?2.肾上腺素注射液取1:1000的肾上腺素1.5ml加热煮沸冷却后的生理盐水2.5ml,混匀即得含原液0.375ml的肾上腺素应用液。?3.葡萄糖氧化酶法测定血液的相关试剂。?4.二甲苯棉球、干棉球、注射器。?5.家兔Р操作步骤:Р1.取预先饥饿一昼夜的家兔2只,分别作注射胰岛素和肾上腺素标记,称重并记录之。?2.取血固定家兔,用手轻柔耳缘,以二甲苯棉球涂擦耳翼背面,使耳静脉血管扩张,用抗凝剂处理后的注射器从耳缘静脉远端刺入血管,一次采血5~10ml,取血后用干棉球压迫耳静脉止血,立即注入盛有抗凝剂的离心管内,并标明“胰前”、“肾前”,轻轻摇匀以防血液凝固。冬天室温较低时,耳静脉采血往往失败,因此可以心脏穿刺采血:左侧3~4肋间,触摸心跳最明显处,消毒后穿刺进针取血。?3.注射激素向家兔腹部皮下按1ml/kg分别注射胰岛素和肾上腺素应用液。记录注药时间。?4.注射胰岛素50分钟,注射肾上腺素30分钟后,分别按上述方法取血,标以“肾后”“胰后”。?5.3000r/min离心5分钟分离血浆备用。Р血糖测定Р试剂Р空白Р标准Р胰前Р胰后Р肾前Р肾后Р血浆(或血清)Р/Р/Р20Р20Р20Р20Р葡萄糖标准液(5.5mmol/L)Р/Р20Р/Р/Р/Р/Р蒸馏水Р20Р/Р/Р/Р/Р/Р酶酚混合液Р2.0Р2.0Р2.0Р2.0Р2.0Р2.0Р将各管分别混匀后,置37℃恒温水浴保温15min,冷却至室温,分光光度计波长505nm处,空白管矫正吸光度值为零,读取数值Р结果处理:Р1.胰前血糖浓度:mmol/L=(胰前管A/标准管A)*5.5?2.胰后血糖浓度:mmol/L=(胰后管A/标准管A)*5.5?3.肾前血糖浓度:mmol/L=(肾前管A/标准管A)*5.5?4.肾后血糖浓度:mmol/L=(肾后管A/标准管A)*5.5
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