。Р缺点:?原核生物细胞不具备真核生物的蛋白质折叠复性系统,即使真核生物基因能得到表达,得到的多是无特异性空间结构的多肽链。?原核生物细胞缺乏真核生物的蛋白质加工系统,而许多真核生物蛋白质的生物活性正是依赖于其侧链的糖基化或磷酸化等修饰作用。?原核细胞内源性蛋白酶易降解异源蛋白,造成表达产物不稳定。Р三、蓝细菌(蓝藻)?蓝藻——又称蓝绿藻或蓝细菌,它含有叶绿素a(缺乏叶绿素b)和藻胆素,具有光合系统Ⅰ(PS Ⅰ) 和光合系统Ⅱ(PS Ⅱ)、能进行光合作用,但它又具有细菌的特征,无细胞核及双层膜结构的细胞器,染色体裸露,是一种典型的原核生物。?蓝藻作为表达外源基因的受体菌兼具微生物和植物的优点,具体表现在:?基因组为原核型,除了裸露的染色体DNA外,不含叶绿体DNA和线粒体DNA,遗传背景简单,便于基因操作和外源DNA的检测。?细胞壁属G-,主要由肽聚糖组成,便于外源DNA的转化。?营光合自养生长,培养条件简单,只需光、CO2、无机盐、水和适宜的温度就能满足生长需要。?多种蓝藻含内源质粒,为构建蓝藻质粒载体提供了极好的条件。?蓝藻富含蛋白质,并且多数蓝藻无毒,早已用作食物或保健品,在此基础上采用转基因技术,把一些重要药物的基因转入无毒蓝藻,就可达到锦上添花的效果。Р真核生物细胞Р一、真菌受体细胞?真菌是低等的真核生物,其基因结构、表达调控机制以及蛋白质的加工与分泌都具有真核生物的特征,因此利用真菌细胞表达高等动植物基因具有原核生物细胞无法比拟的优点。?酵母菌细胞?是单细胞真核微生物,外源真核基因最理想的表达系统。?优点:?酵母菌是结构最为简单的真核生物之一,其基因表达调控机理比较清楚,遗传操作相对比较简单。?具有真核生物蛋白翻译后修饰加工系统。?不含有特异性病毒,不产生毒素。?培养简单,利于大规模发酵生产,成本低廉。?能使外源基因表达产物分泌至培养基中,便于产物的提取和加工。
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