第五章高效毛细管电泳和毛细管电动色谱分析法Р2Р毛细管电泳的基本原理Р3Р毛细管电泳装置Р4Р毛细管电动色谱Р5Р实验技术Р6Р1Р概述Р应用Р第一节概述Р电泳:带电粒子在电场作用下于一定介质中发生定向运动的现象。?高效毛细管电泳:以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力进行高效、快速分离的一种电泳技术。Р一、发展历史Р目前:分析化学领域中发展最快的分离技术Р1930年,瑞典化学家Tiselius(1948年荣获诺贝尔化学奖)Р1981年,Jorgenson和Lukacs成功地对丹酰化氨基酸样品进行了快速、高效分离。Р二、优缺点Р样品量少、操作简便、分离效率高、分析成本低、应用面广。? 但CE制备能力差,在进样的准确性和检测灵敏度等方面比高效液相色谱法略逊。Р当电场强度一定时离子的电泳淌度不同,在电场中的移动速率不一样,利用这个原理可以将不同的离子彼此分离。Р2、电渗流? 电渗流是指毛细管中的溶剂在轴向直流电场作用下而发生的定向流动现象。РNРNРNРNРNРNР界面Р吸附层紧密层扩散层Р管壁Р毛细管内壁的双电层模型?-.荷负电粒子; +.荷正电粒子; N.电中性粒子Р电渗流与高效液相色谱的流型对比Р与电泳类似,常用电渗淌度表示电渗流大小,如下式所示:? ?式中,ν为电渗淌度;μeo为电渗速度.?在电渗流存在的情况下,组分的迁移速度是它的电泳速度和电渗流速度的总和,可以用下式表示:Р二、毛细管区带电泳Р特征:是整个系统都用同一种电泳缓冲液充满.缓冲液由缓冲试剂、pH调节剂、溶剂和添加剂组成。?分离原理:当电流通过时,缓冲液中的阳离子、阴离子分别以恒定的速度向阳极和阴极移动,由于试样中各个组分间荷质比的差异,以不同的速度在分立的区带内进行迁移.如果试样中各个组分的迁移率差别较大,就能将各个组分分离。
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