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普通生物学实验 实验一植物可溶性糖含量测定

上传者:非学无以广才 |  格式:ppt  |  页数:8 |  大小:757KB

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指导老师: 辛德东一、实验原理糖类遇浓硫酸脱水生成糖醛或其衍生物,反应如下: ?糠醛或羟甲基糠醛进一步与蒽酮试剂缩合产生蓝绿色物质, 其在可见光区 620nm 波长处有最大吸收, 且其光吸收值在一定范围内与糖的含量成正比关系。此法可用于单糖、寡糖和多糖的含量测定,并具有灵敏度高,简便快捷,适用于微量样品的测定等优点。?吸光度就是用来衡量光被吸收程度的一个物理量。 A = abc ,其中 a为吸光系数,单位 L/(g · cm),b 为液层厚度(通常为比色皿的厚度),单位 cm ,c为溶液浓度, 单位 g/L 影响吸光度的因数是 b和c。a是与溶质有关的一个常量。二、实验材料、仪器及试剂 1 .材料: 苹果果肉 2.仪器:分光光度计、漏斗、容量瓶、试管架、剪刀、研钵 3.试剂: (1)标准葡萄糖: 0、 0.1 、 0.2 、 0.4 、 0.6 、 0.8 、 1.0 mg/ml (2)蒽酮试剂: 1 50 mg 蒽酮, 溶于 100 ml 稀硫酸中, 棕色瓶避光处贮藏; 三、实验方法 1.可溶性糖的提取:称取 0.1 g 苹果果肉置于研钵,加 10 ml 水,研磨,过滤,定容至 100 ml 。 2.标准曲线制备:按下表数据配制一系列不同浓度溶液的标准葡萄糖溶液( 0-6 号管)和样品溶液( 7-9 号管) 012345678 G (0.1 mg/ml) 0 0.1 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 0.5 0.5 H2O 1.0 0.9 0.8 0.6 0.4 0.2 0 0.5 0.5 蒽酮 333333333 3.沸水浴 10分钟,冷却 4. 620 nm 测光吸光值( A),以吸光值为纵坐标,葡萄糖浓度为横坐标,制作标准曲线。 5.根据标准曲线求苹果五、结果计算设V为植物样品稀释后的体积 C为提取液的含糖量 W为植物样重可溶性糖%=CV/W

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