抗原成分结合,将抗原放大4 显色由于抗体与抗原结合后形成的免疫复合物是无色的,因此,还必须借助于组织化学方法将抗原抗体反应部位显示出来(常用显色剂DAB显示为棕黄色颗粒)。5 显微镜观察、定位通过抗原抗体反应及呈色反应,显示细胞或组织中的化学成分,在显微镜下可清晰看见细胞内发生的抗原抗体反应产物,从而能够在细胞或组织原位确定某些化学成分的分布、含量。组织或细胞中凡是能作抗原或半抗原的物质,如蛋白质、多肽、氨基酸、多糖、磷脂、受体、酶、激素、核酸及病原体等都可用相应的特异性抗体进行检测。特异性、敏感性、定位免疫学的基本原理决定了免疫组织化学技术具有高度特异性,因此,免疫组织化学技术从理论上讲也是组织细胞中抗原的特定显示ABC法或SP法的出现,使抗体稀释上千倍、上万倍仍可在组织细胞中与抗原结合,所以免疫组织化学技术又具有敏感性高的特点。免疫组织化学技术通过抗原抗体反应及呈色反应,对组织和细胞中抗原的准确定位,使其可以同时对不同抗原在同一组织或细胞中定位观察,并进行形态与功能相结合的研究。(二)免疫组织化学技术的应用范围近年来,随着抗原的提纯和抗体标记技术的改进,特别是自70年代中期杂交瘤技术与单克隆抗体技术的引入,使制备的抗体具有高度的特异性。简便而敏感的免疫酶标技术能够用于普通培养细胞(株)、常规福尔马林固定石蜡包埋的组织切片、若干年前的存档标本等,从而使该技术在生物医学研究和临床病理学、微生物学诊断中,日益显示出巨大的实用价值。1 确定细胞类型通过特定抗体标记出细胞内相应抗原成分,以确定细胞类型。如角蛋白是上皮性标记,前列腺特异性抗原仅见于前列腺上皮,甲状腺球蛋白抗体是甲状腺滤泡型癌的敏感标记,而降钙素抗体是甲状腺髓样癌的特有标记。有些细胞(如表皮内朗格汉斯细胞、黑色素细胞、淋巴结内指突状和树突状网织细胞)光镜下不易辨认,但免疫组化标记(S-100蛋白等)能清楚显示其形态。
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