养(四)、 ES细胞的原代培养和继代培养(五)、 ES/EG 细胞系的特性和鉴定三、干细胞应用(治疗失明) 一、干细胞简介一、干细胞简介 1、定义干细胞( stem cell ): 是指具有无限或较长期的自我更新能力,并能产生至少一种高度分化子代细胞的细胞 2、分类根据细胞分化潜能大小: 全能干细胞(totipotent stem cell ) 三胚层多能干细胞(pluripotent stem cell ) 单胚层多能干细胞(multipotent stem cell ) 单能干细胞(monopotent stem cell ) 根据细胞来源不同: 干细胞胚胎性干细胞: 指源于囊胚内细胞团( ISM ) 的胚胎干细胞( ES)。它均属于三胚层多潜能性干细胞。如: ES细胞、 EG细胞、 EC细胞等。成体干细胞: 是指那些具有组织特异性的细胞, 它们主要用于维持细胞功能的稳定,具有修复和再生能力,能够产生新的干细胞,或者能按一定的程序分化,形成新的功能细胞,使组织和器官保持生长和衰退的动态平衡。如:神经干细胞,表皮干细胞。 ES 细胞:存在于早期胚胎内细胞团的全能干细胞。 EG 细胞:来自于早期胚胎嵴原始生殖细胞的多能干细胞。 EC 细胞:来自于自发或诱发的生殖细胞瘤或畸胎瘤中的多能干细胞。二、 ES/EG 细胞培养建系技术 ES 细胞建系: 将早期胚胎(桑椹胚或囊胚)与抑制分化物共培养,使之增殖并保持未分化状态,随着传代数的增多,细胞数量越来越多,直到建立 ES细胞系。 EG 细胞建系: EG细胞在体外培养增殖能力较 ES细胞弱,所需条件特别是饲养层较 ES细胞严格,所以 EG细胞培养建系较 ES细胞困难。?(一)、 ES细胞的分离?(二)、饲养层细胞饲养法?(三)、无饲养层培养?(四)、 ES细胞的原代培养和继代培养?(五)、 ES/EG 细胞系的特性和鉴定
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