皿的洗涤和灭菌前的准备。掌握培养基和无菌水的制备方法。掌握高压蒸气灭菌技术。3实验材料药品:牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂、蒸馏水等。高压蒸气灭菌锅、烘箱、细菌过滤器、酒精灯。其它:培养皿、试管、移液管、锥形瓶、烧杯、玻璃珠等。4实验程序玻璃器皿的洗涤和包装培养基的制备无菌稀释水的制备培养基和玻璃器材等的灭菌5实验程序1(玻璃器皿的洗涤和包装)清洗并烘干玻璃器皿:如培养皿、移液管、试管等。棉塞的制作包装培养皿和移液管等。6实验程序2(培养基的种类)据组成成分可分为:1.合成培养基:由各种纯化学物质按一定比例配制而成。2.半合成培养基:有一部分纯化学物质和另一部分天然物质配制而成。3.天然培养基:利用天然来源的有机物配制而成。从培养基的物理状态可分为1.液体培养基:不加凝固剂的液体状态培养基。2.固体培养基:在液体培养基中加入15~30g/L左右的琼脂。3.半固体培养基:在液体培养基中加入3~5g/L左右的琼脂。7实验程序2(培养基的种类)常用凝固剂为琼脂(其次为明胶),又叫洋菜、冻粉。8实验程序2?(培养基的配制方法和步骤)1.取一个300mL烧杯,装150mL蒸馏水。2.按配方逐一正确称取各种成分,依次加入水中溶解。注意:a.前一种成分溶解之后,才能加入下一种成分b.可加热促进各成分溶解c.加热过程应不断搅拌,以免糊底烧焦,并适当补充因蒸发而损失的水量。培养基配方牛肉膏蛋白胨氯化钠琼脂蒸馏水pH数量0.75g1.5g0.75g3g150mL7.69实验程序2?(培养基的配制方法和步骤)3.调pH值:用10%NaOH调pH至7.6,用精密pH试纸对照。4.分装:将培养基分装于5支试管,其余全部倒入250mL锥形瓶中,分别塞上棉塞。注意不要污染棉塞和瓶口。5.包扎成捆,挂上标签,注明何种培养基。6.灭菌备用:培养基灭菌后必须在37℃下恒温培养24h,确定无菌生长,方可使用。10
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